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目的：探讨Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导在食管癌病变中的作用，观察启膈散沙参麦冬汤、通幽汤、补气运脾汤各证方影响人食管癌细胞株EC9706细胞增殖、凋亡及Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导的作用，从细胞凋亡信号转导角度揭示启膈散等证方治疗食管癌的作用机制和差异，以药效反证方法探讨肿瘤中医病机“郁、痰、瘀、虚”的分子生物学内涵。
方法：体外培养人食管癌细胞株EC9706细胞，分别用启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤处理细胞，倒置显微镜下观察EC9706细胞增殖和形态变化；MTT法检测各证方对EC9706细胞增殖影响的量效关系；TUENL法和荧光显微镜观察各证方诱导EC9706细胞凋亡的作用；AnnexinV FITC/PI双标记流式细胞术检测各证方诱导EC9706细胞凋亡率；Western blot分析检测各证方对EC9706细胞凋亡相关蛋白表达的影响。
结果：1．启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤可不同程度地明显抑制人食管癌细胞株EC9706细胞增殖，其抑制率呈现浓度依赖性；补气运脾汤对体外培养细胞增殖的直接抑制作用很弱。2．启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤不同程度地诱导细胞发生凋亡，各组诱导凋亡早期细胞的凋亡率依次为：沙参麦冬汤组>启膈散组>通幽汤组。沙参麦冬汤诱导早期凋亡细胞呈药物浓度依赖关系。3．启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对EC9706细胞Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路的相关蛋白表达具有不同程度的影响作用。启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤组明显增强Caspase-3蛋白表达，沙参麦冬汤组和启膈散组最强，通幽汤次之；启膈散增强Fas、TNFR1、DR5蛋白表达，沙参麦冬汤增强FADD、Cyt.CFas、TNFR1、DR5蛋白表达。
结论：启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤均通过不同程度诱导人食管癌EC9706细胞凋亡抑制细胞增殖；补气运脾汤组对体外培养细胞增殖的直接抑制作用很弱。启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤通过增强食管癌细胞Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导，诱导细胞凋亡。以方测证，肿瘤中医病机中的气郁、痰阻、血瘀、气阴亏虚与Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导减弱相关。