目的探讨线粒体通透性转换孔（mitochondrial permeability transition pore,MPTP）在七氟烷暴露6 h后诱导SD大鼠胎鼠海马神经元损伤中的作用及其机制。方法取孕d（18±1）SD大鼠胎鼠海马组织,经消化吹打制成单细胞悬液后种植于DMEM/F12培养基并随机分为对照组（Con组）、环孢素A组（Cs A组）、3%七氟烷暴露6 h组（Sevo组）、环孢素A预处理+3%七氟烷6 h组（Sevo+Cs A组）。每组细胞培养12 h后均全量换液为Neurobasal培养基,并且神经元培养至第3天时加入5-氟-2′-脱氧尿苷（5-Fluoro-2′-deoxyuridine,FUDR）抑制胶质细胞生长。通过观察自然生长下海马神经元在不同培养时间点下的生长状态（d 1,d 3,d 5,d 7,d 9,d 13,d 17,d 21）和检测自然生长状态下神经元活力,确定建立七氟烷细胞损伤模型的时间。七氟烷细胞损伤模型的建立过程为:在细胞培养至第7天时先将细胞放入充满3%七氟烷的培养小室,然后把含3%七氟烷的培养小室放入CO2细胞培养箱处理6 h,期间间断检测小室七氟烷浓度,并保证培养小室中的浓度恒定。Cs A组、Sevo+Cs A组细胞在培养至第6天时加入相应浓度的Cs A预处理24 h。24 h后Con组、Cs A组放入充满95%空气+5%CO2的培养小室中,然后置于CO2细胞培养箱处理6 h;Sevo组、Sevo+Cs A组放入充满3%七氟烷的培养小室中处理6 h。使用CCK-8试剂盒检测不同组的神经元的细胞活力,TUNEL染色检测神经元凋亡,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）,Calcein AM染色检测MPTP开放程度,免疫蛋白印迹法（Western blot）测定脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic facto,BDNF）、突触后致密蛋白95（postsynaptic density protein,PSD-95）、突触素（Snaptophysin）、突触蛋白1（Snapsin-1）、CypD等蛋白的表达。结果海马神经元在贴壁后至第7天迅速成长,第7天时神经元胞体饱满且周围存在光晕,细胞突起形成丰富致密的网络。细胞活力检测显示:海马神经元在培养的第1～7天时细胞活力逐渐升高,第7天细胞活力最高,从第8天开始细胞活力逐渐下降。与Con组相比,Cs A组用不同浓度的Cs A（0.1、0.5、1μmol/L）预处理24 h对神经元活力的影响的差异无统计学意义;与Sevo组相比,Cs A的浓度为0.1μmol/L时细胞保护作用最好（P＜0.01）。与Con组相比,Sevo组神经细胞凋亡率升高（P＜0.01）,突触蛋白表达降低（P＜0.05）,MMP值下降（P＜0.01）,MPTP开放程度增加（P＜0.01）,CypD蛋白表达增加（P＜0.01）;与Sevo组相比,0.1μmol/L Cs A预处理可以降低细胞凋亡率（P＜0.01）,增加突触蛋白表达（P＜0.05）,阻止线粒体膜电位下降（P＜0.05）,减少MPTP开放（P＜0.01）,降低CypD蛋白表达（P＜0.01）。结论七氟烷暴露可导致SD大鼠海马神经元损伤,其机制与促进CypD介导的MPTP开放有关。MPTP开放的特异性抑制剂Cs A可以减少七氟烷暴露导致的海马神经元的凋亡和突触损伤,维持线粒体膜电位,抑制MPTP开放和下调CypD蛋白表达。