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背景和目的:Survivin是细胞凋亡抑制基因IAP家族中的一员,在多种肿瘤细胞中显示高表达与肿瘤的发生发展密切相关。我们前期在大肠癌细胞中用MALDI/TOF/MS分析法筛选出与Survivin相结合的新蛋白多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-6(PARP6)。目前关于PARP6在肿瘤中的机能和作用以及与Survivin的关系并不明确。本研究首先探讨PARP6在人大肠癌组织中的表达情况,研究PARP6与大肠癌临床病理特征之间的关系。并且同时分析PARP6与Survivin在大肠癌中表达的相关性。其次探讨PARP6在大肠癌中表达的意义,以探究PARP6在大肠癌发生发展、侵袭、转移中的作用,为大肠癌的诊断、预后判断提供依据,为其治疗提供新的分子治疗靶点。方法:收集大肠癌组织238例及癌旁正常大肠组织20例,大肠癌冰冻组织4例,癌旁正常大肠冰冻组织4例。采用免疫组织化学方法在蛋白水平上检测PARP6和Survivin两者在大肠癌及正常大肠粘膜组织中的表达。采用Western blot方法在蛋白水平上检测PARP6和Survivin在大肠癌细胞株、大肠癌冰冻组织及癌旁正常大肠冰冻组织中的表达情况。利用脂质体法使质粒PARP6和ΔC PARP6转染大肠癌细胞SW480,对转染后的SW480细胞进行Western blot法和MTT法检测,探究PARP6与周期相关蛋白p21、p27及凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-XL之间的关系,同时检测PARP6对大肠癌细胞存活率的影响。利用统计学方法对以上的实验结果进行分析,PARP6和Survivin的表达水平在不同组间使用t检验,并用χ~2检验分析PARP6和Survivin的表达与组织学分化、TNM分期(Tumor node metastasis)、肿瘤侵袭及分期等之间的相关性分析。用Kaplan-Meier生存曲线分析PARP6和Survivin的表达与肿瘤患者术后总生存率之间的关系,并用对数秩检验进行校验等。结果:(1)免疫组织化学方法检测的238例大肠癌患者的癌组织和20例正常大肠组织中,PARP6蛋白在大肠癌组织中低表达,在正常大肠粘膜组织中高表达;Survivin在大肠癌组织中高表达,在正常大肠粘膜组织中低表达。(2)Western blot法检测的大肠癌细胞株中,PARP6在SW620、DLD-1、SW48、HT-29和SW837细胞株中高表达,在SW480和HCT116大肠癌细胞株中低表达,而Survivin在细胞株中均呈现高表达;此外,PARP6在大肠癌冰冻组织中呈低表达,在正常大肠冰冻组织中呈高表达,而Survivin的表达情况与PARP6恰相反。(3)PARP6表达水平的降低与大肠癌患者的组织学分化、TNM分期、肿瘤侵袭及分期密切相关(P<0.001),与患者的年龄、性别、肿瘤的大小(直径≥5 cm或<5 cm)及脉管浸润等无关(P>0.05)。Survivin的表达水平升高与大肠癌患者的组织学分化、TNM分期、肿瘤侵袭及分期有关(P<0.001),与患者年龄、性别、肿瘤的大小(直径≥5 cm或<5 cm)及脉管浸润等无关(P>0.05)。此外,PARP6和Survivin、Ki-67在大肠癌中的表达水平呈负相关,差别有统计学意义(P<0.01)。(4)PARP6低表达与患者的预后密切相关(P<0.01);Survivin的过表达与患者的预后密切相关(P<0.01)。(5)PARP6降低了大肠癌细胞的存活率,使细胞周期抑制蛋白p21、p27的表达升高,凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-XL的表达降低。结论:(1)在大肠癌组织中PARP6低表达,Survivin过表达。(2)PARP6低表达与大肠癌患者的组织学分化、TNM分期、肿瘤侵袭及分期之间有密切的联系。(3)PARP6的低表达预示着大肠癌患者的预后不佳。(4)PARP6低表达对大肠癌的发生、发展及预后等过程中有重要的作用。(5)PARP6与Survivin在大肠癌中的表达有相关性,推测PARP6可能调控Survivin的表达。