瘢痕形成过程中Wnt信号通路活性调节机制的研究

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目的研究在瘢痕形成过程中Wnt信号通路的活性调节机制,以探讨瘢痕形成的调控机制。方法1、切取患者的瘢痕组织与邻近正常组织,利用免疫组织化学方法检测β-catenin在其中的分布情况。其中三例为椎板切除术后硬膜外瘢痕,另外两例为皮肤瘢痕。我们所取的瘢痕组织均为超过八周,已停止生长的成熟瘢痕组织。2、从切取的患者的瘢痕组织和邻近正常组织中分离培养成纤维细胞,利用免疫荧光标记方法检测体外培养的成纤维细胞中β-catenin的分布情况。3、对体外培养的瘢痕组织成纤维细胞中的β-catenin和反式高尔基体的标记蛋白Syntaxin6进行免疫荧光双标记,利用激光共聚焦显微成像系统摄取图像进行分析,对β-catenin是否在高尔基体聚集进行研究。结果1、瘢痕组织成纤维细胞中β-catenin的分布与正常组织成纤维细胞不同,后者β-catenin在胞浆中呈弥散分布,而前者胞浆中的β-catenin呈团块样聚集在临近细胞核的位置。2、体外培养的瘢痕组织和邻近正常组织的成纤维细胞中的β-catenin的分布情况不同,体外培养的瘢痕组织中的β-catenin在核周聚集,而在相邻正常组织来源的成纤维细胞中的β-catenin则在胞浆中呈弥散分布。3、对利用激光共聚焦显微成像系统摄取的相关图像进行重叠分析,发现体外培养的瘢痕组织成纤维细胞中的β-catenin与Syntaxin6的标记位置相互重叠;同时分析Syntaxin6和β-catenin荧光信号的分布,可以观察到二者的信号分布也具有明显的重叠。结论成熟的瘢痕组织成纤维细胞中β-catenin的亚细胞分布与相邻正常组织成纤维细胞存在明显差异:在正常组织成纤维细胞中,β-catenin在细胞浆呈弥散性分布,而在成熟的瘢痕组织成纤维细胞中,β-catenin在胞浆呈团块样聚集,进一步研究表明,其聚集在高尔基体。
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