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未成熟树突状细胞(immature dendritic cells，imDCs)在免疫耐受维持中发挥重要作用，未成熟树突状细胞疫苗成为近年来研究各种炎症免疫疾病治疗、防治器官移植排斥反应和肿瘤免疫治疗等领域的热点。然而，我们缺少一种行之有效的监控手段来监控接种后未成熟树突状细胞在体内的迁移状况。磁共振成像(magnetic resonance imaging，MRI)是一种对人体伤害小，分辨率高，可安全进行活体检查的成像方法，它可以用来示踪用某种特定对比剂，如超小顺磁性氧化铁（ultrasmall superparamagnetic iron oxide，USPIO）标记过的细胞在体内的去向，从而在一定程度上解决监控移植后细胞迁移的问题。未成熟树突状细胞的免疫治疗的成功主要依赖于它的免疫耐受功能，然而USPIO标记未成熟树突状细胞后，是否影响细胞的细胞活性，成熟状态和免疫耐受功能还不清楚。因此，本文主要探索USPIO标记对未成熟树突状细胞产生的影响及标记未成熟树突状细胞的最佳浓度和最佳标记时间;此外我们还探讨了USPIO标记未成熟树突状细胞后通过MRI进行体内示踪的可行性，为今后的进一步研究工作提供技术参考。 本研究的实验内容包括:台盼兰排斥实验、Cell Counting kit-8(CCK-8)测定不同浓度USPIO标记不同时间后对未成熟树突状细胞活力的影响;Annexin-Ⅴ/PI双染法对USPIO标记后未成熟树突状细胞凋亡情况检测;普鲁士蓝染色、可见光吸收光谱检测USPIO标记未成熟树突状细胞后单细胞内铁含量;流式细胞仪、激光共聚焦显微镜检测USPIO标记后细胞表面抗原表达的情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测USPIO标记未成熟树突状细胞后白介素-I0(IL-I0)的分泌情况;混合淋巴反应(MLR)检测标记后未成熟树突状细胞对T淋巴细胞刺激能力;流式细胞仪检测USPIO标记对未成熟树突状细胞吞噬能力的影响;对标记后未成熟树突状细胞进行体外及体内MRI扫描;激光共聚焦显微镜检测USPIO标记后未成熟树突状细胞内溶酶体及自噬体的变化情况;通过加入自噬抑制剂初步探讨自噬对未成熟树突状细胞免疫功能的影响。 本研究的实验结果显示，标记时间过长(≥24 h)会使细胞含铁量增加但会影响细胞活性，高浓度USPIO（≥200μg/ml）则会诱导未成熟树突状细胞成熟并影响未成熟树突状细胞的免疫耐受功能。100μg/ml USPIO标记未成熟树突状细胞12h是最适宜的条件标记条件，此条件下会在体外MRI中引起加高强度的信号改变。此外，时高浓度USPIO会引发未成熟树突状细胞的自噬现象，加入自噬抑制剂后抑制了细胞的成熟，增加了IL-10的分泌量，减少了对T淋巴细胞的刺激能力，同时细胞的抗原吞噬能力显著下降。因而，我们初步推测自噬抑制未成熟树突状细胞成熟，诱导其免疫耐受功能但抑制其抗原吞噬功能。