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目的:采用气流吹扫微注射器萃取法与气相质谱法联用的方法(简称GP-MSE-GC-MS法)分析北细辛药材中挥发性成分,并建立了北细辛的GP-MSE-GC-MS指纹图谱,采用HPLC法研究北细辛药材指纹图谱,同时初步探讨北细辛药材的血清药物化学,为北细辛药材的质量控制提供实验基础。方法:1.北细辛的GP-MSE-GC-MS分析研究分别采用气流吹扫微注射器法(GP-MSE法)和水蒸气蒸馏法(SD法)提取北细辛全草中挥发性成分;GP-MSE法提取北细辛根茎、叶柄和叶中挥发性成分;GP-MSE法提取不同批次北细辛的挥发性成分,按照如下GC-MS分析条件测定其挥发性成分,并进行分析比较。GC-MS分析条件:DB-5MS石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25gm),载气为He(纯度(?)99.99%),流速为1mL/min。采取不分流进样,进样量为2.0μL。采用程序升温,进样口的温度为280℃。起始温度为45℃,保持1min,4℃/min升高至250℃,再以6℃/min升高至280℃,保持5min。离子源为EI,温度为200℃,其轰击能量为70eV。2.北细辛的HPLC分析研究选择不同批次北细辛,按照如下HPLC分析条件分析,并进行分析比较。HPLC分析条件:KroasilC18分析柱(5μm,4.6mm×250mm);柱温为25℃;梯度洗脱流动性,水(A)-甲醇(B)梯度洗脱(A%为72%→70%→50%→45%→20%→20%,相应时间周期为0→5min→15min→25min→45min→60min);检测波长为290mm;体积流量1.0mL/min,进样量为20μL。3.北细辛的血清药物化学研究北细辛药材提取溶剂为甲醇,SD大鼠给药剂量5.4g/kg,2次/d连续5天灌胃,于最后1d灌胃后1h后眼球取血。采用HPLC方法分析血清中的成分。结果:1.北细辛的GP-MSE-GC-MS分析研究GP-MSE法得到的北细辛中挥发性成分的种类明显比SD法多,SD法分离出38个峰,鉴定出30个峰,已鉴定出的挥发性成分占总挥发性成分的含量百分比为98.42%,而GP-MSE法分离出96个峰,鉴定出46个成分,已鉴定出的挥发性成分占总挥发性成分的含量百分比为94.23%。从北细辛药材根茎、叶柄和叶中分别检出了84、79和69个峰,分别鉴定出33、34和39种成分,已鉴定出的挥发性成分占总挥发性成分的含量百分比分别为89.78%、81.99%和89.20%。其中根茎与叶柄有28个共有成分,根茎与叶有24个,而叶柄与叶存在26个共有成分,根茎、叶和叶柄3个部位共有成分有21个,相对百分含量在1%以上的为糖醛、糖醇、甲基丁香酚、十六烷酸和十五烷。根茎中百分含量最大的是甲基丁香酚(31%),再次是(2E,4Z,8Z,10E)-N-异丁基-2,4,8,10-十二四烯酰胺(11%);叶柄中百分含量最大是亚油酸(15%),再次是甲基丁香酚(12%);叶中百分含量最大的是十六烷酸(10%),再次是2,3-二氢苯并呋喃(9%)。就主要成分而言,根茎和叶柄所含的主要成分较为相似,叶中则有很大不同。在叶中共鉴定出了10种特有成分分别为2,3-二氢苯并呋喃、葎草烯、绿花白千层醇、1,2-二甲基-1-环己烯、十五醛、六氢法呢基丙酮、叶绿醇、二十烷酸、二十七烷醇和二十四烷醇。2,5-二羟基苯乙酮仅仅存在于叶柄中,在根茎中鉴定出了2种特有成分为枫内酯和α-布藜烯。运用GP-MSE-GC-MS法对10批次不同来源的北细辛样品进行分析,共鉴定出37个共有峰,方法学考察的精密度、稳定性、重现性较好,并建立了其指纹图谱。通过主成分分析得出不同批次北细辛可以很好的聚为一类。2.北细辛的HPLC研究运用HPLC法对10批不同产地的北细辛药材样品进行分析,发现有13个共有峰,方法学考察的精密度、稳定性、重现性较好,并建立了其指纹图谱。3.北细辛的血清药物化学研究通过对10只大鼠血清化学成分HPLC图谱分析并建立了北细辛血清药物化学的HPLC指纹图谱,检测出6个共有峰,与原药材、空白血清图谱的比较分析,初步认为有3个峰是以原型药物形式进入大鼠体内的;3个峰可能是药材中某种成分的代谢产物或是大鼠给药后自身应激而产生的物质。结论:1.GP-MSE法比SD法更适合北细辛的挥发性成分的研究。2.北细辛药材不同部位的挥发性成分的种类和含量差异较大。3.建立的GC-MS指纹图谱以及HPLC指纹图谱,可应用于北细辛药材的品质评价和质量控制。4.北细辛药材的血清药物化学成分主要来自原药材原型成分、代谢或应激产物,两个方面。