随着社会的发展，肥胖、糖尿病、心血管等代谢相关疾病的发病率逐年提升。经研究发现代谢性疾病有一种共同的表现即血脂代谢紊乱。而引起血脂代谢紊乱的主要原因是血浆中运输脂类的脂蛋白代谢异常。脂蛋白酯酶（ L ipo prote in lipa se，LP L）是一种限速酶，在脂质代谢中发挥重要作用。LP L的主要生理功能是催化富含甘油三酯（ tr iglycer id e， T G)的脂蛋白——乳糜微粒（chylomicron,CM）和极低密度脂蛋白（very low density lipoprotein,VLDL)分解为脂肪酸和单酸甘油酯，为组织的氧化反应供能和贮存。由于生理状态下，LP L主要在心肌、骨骼肌、脂肪组织等肝外组织中表达，在肝脏中的表达量极低，过去针对肝外组织LP L的研究居多，目前为止，对于肝脏LP L的功能了解很少。　　本课题组根据Cre/LoxP技术的原理将LPL LoxP小鼠与受Alb启动子介导、肝脏特异表达的Cre重组酶转基因小鼠交配繁殖（ Alb-cre）成功构建了LP L肝脏特异性敲除小鼠模型，并对小鼠模型进行相关脂代谢数据变化分析，最终得出结论，肝脏LP L对成年小鼠血浆脂质代谢的调控具有重要的意义。　　第一部分生理状态下LPL在肝脏中的表达情况分析　　目的：研究正常小鼠肝脏中LP L的表达情况。　　方法：选取出生不同时期的C57BL/6小鼠，提取其肝脏及心肌、骨骼肌、肺、胃、肾脏、小肠、脑组织等肝外组织 RN A，并反转录成 cDN A，最终通过Quantitative RT-PCR分析其LPL的mRNA表达水平。　　结果：肝脏 LP L的表达在小鼠出生后的前三周呈上升趋势，第三周时处于最高水平；三周后表达量迅速下降，六个月以后维持在较稳定的低表达状态。成年小鼠LP L主要在心肌、骨骼肌、脑组织等肝外组织中表达。　　讨论：成年小鼠肝脏中LP L的表达量很低。　　第二部分 LPL基因肝脏特异性敲除小鼠模型的构建与鉴定　　目的：构建LP L肝脏特异性敲除小鼠模型，为研究肝脏LP L的功能提供实验工具。　　方法：将LPL LoxP工具鼠与受Alb启动子介导、肝脏特异表达的Cre重组酶转基因小鼠交配繁殖（ Alb-C re），提取后代小鼠鼠尾基因组DN A后，用P CR的方法对其基因型进行鉴定，基因型为 F/F/Cre的为所需小鼠模型。并用Quantitative RT-PCR鉴定模型是否构建成功。　　结果：本课题组成功构建了敲除率达90％的LP L肝细胞特异性敲除小鼠模型。　　讨论：小鼠模型的成功为接下去的实验研究提供了理想的实验工具。　　第三部分肝脏LPL缺失，小鼠糖脂代谢指标的变化及其意义　　目的：通过对LP L肝脏特异性敲除小鼠模型进行糖脂代谢有关实验，分析肝脏LP L在糖脂代谢中的作用。　　方法：肝脏LP L对脂代谢影响的研究中，对肝脏LP L基因敲除小鼠及高脂喂养小鼠血浆 LPL蛋白的表达及其活性进行测定，测定两者血清中 TG、TC、FFA含量、餐后 T G清除能力、P407脂质分泌实验。糖代谢研究中，测定肝脏LP L敲除小鼠的空腹及随机血糖、胰岛素、葡萄糖耐量实验、胰岛素耐量实验。　　结果：肝脏LP L的缺失会引起血浆LP L含量及活性的明显降低。餐后T G清除能力下降，血中T G、T C的含量升高，FFA含量下降。肝脏T G、T C水平不受影响。对腺病毒诱导的成年 LP L肝脏中敲除小鼠进行研究。实验结果与Cre-Lo xp构建的小鼠模型一致。高脂饮食诱导的肥胖LP L肝脏特异性敲除小鼠血清T G、T C含量上升，FFA含量下降。肝脏LP L敲除小鼠的空腹血糖、随机血糖、糖耐量、胰岛素耐量等指标均没有出现明显的变化。　　讨论：肝脏LP L对T G代谢的调节说明肝脏LP L在脂质代谢中发挥重要作用，并在成年小鼠模型中得到验证。病理模型的研究提示肝脏 LP L可能对改善肥胖小鼠的高脂血症有所帮助。糖代谢指标的变化说明肝脏 LP L对糖代谢没有显著的调控作用。