细菌纤维素产生菌的筛选及其培养基优化

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目前,细菌纤维素(bacterial cellulose,BC)及其产生菌在生物材料、医药和食品工业领域取得了巨大的发展和应用。本课题从浙江传统玫瑰醋发酵液中分离获得一株具有细菌纤维素生产能力的Acetobacter pasteurianus MGC-N8819。以此菌株为出发菌株,通过考察培养基碳源种类、碳源浓度,扩大培养、间歇补料的培养方式,探究了该菌株细菌纤维素生产性能,同时表征了细菌纤维素理化性质。在此基础上,考察了以莲藕及其副产物为碳源进行细菌纤维素合成,探究其废弃物的利用能力,以期降低生产成本和实现废弃物的再利用。A.pasteurianus MGC-N8819最初细菌纤维素产量为6.6 g/L。经过葡萄糖、甘油、葡萄糖-甘油复合碳源,以及果葡糖浆等碳源种类比较,发现果葡糖浆为碳源时细菌纤维素产量最高,可达8.1 g/L。对果葡糖浆初始浓度进行优化,果葡糖浆浓度为40 g/L时,细菌纤维素产量可提高到9.5 g/L。培养基表面积及深度显著影响细菌纤维素的产率,通过探究不同表面积对细菌纤维素合成的影响,结果表明表面积为698 cm~2时,细菌纤维素产量最高为14.9 g/L,细菌纤维素生产效率、底物转化率、底物消耗率最大分别为1.86 g/L/day、59%、3.125 g/L/day。不同V:A对细菌纤维素合成影响的结果表明V:A比值为6,细菌纤维素产量(19.8 g/L)、生产效率(2.48 g/L/day)、底物转化率(60%)、底物消耗率(4.13 g/L/day)最高。以体积/表面积比值6为扩大参考,将发酵体积从748 cm~3扩大到4002 cm~3后,细菌纤维素产量为10 g/L。采用间歇补料方式,细菌纤维素产量可达21.8 g/L,同时生产效率可达1.6 g/L/day。莲藕是浙江省的一种重要农产品,具有广泛种植。以淀粉酶-糖化酶处理莲藕废弃物并作为培养基时,该菌株的细菌纤维素产量最高为2.1 g/L,细菌纤维素生产效率为0.26 g/L/day,底物转化率为56%。衍生的细菌纤维素通过XRD分析显示高达90.5%的高结晶度指数,通过TGA测定显示其具有高热稳定性,这与高拉伸强度(82 MPa)和断裂伸长率(26%)一致。这表明A.pasteurianus MGC-N8819有望成为细菌纤维素生产的有价值的候选者,而莲藕及其副产品是可能的替代碳源。
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