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目的:顺铂（Cisplatin,CDDP）在肿瘤的治疗中应用广泛,但是其耳毒性作用因机制不清一直缺乏有效的预防和治疗措施。本研究以雄性C57 BL/6J小鼠为研究对象,探讨CDDP是否通过诱导氧化应激水平升高引起耳蜗血管纹毛细血管周细胞（Pericytes,PCs）线粒体途径的细胞凋亡,以及槲皮素（Quercetin,QU）是否通过抑制CDDP诱导的PCs凋亡调控耳蜗血管纹血迷路屏障（Blood labyrinth barrier,BLB）的通透性,从而发挥对顺铂耳毒性听力损失的保护作用,为预防和和治疗顺铂耳毒性听力损失提供实验依据。方法:动物实验:生理盐水组（NS）、顺铂组（CDDP）、10%二甲基亚砜组（10%DMSO）、顺铂+（50 mg/kg）槲皮素组（Low-dose）和顺铂+（100 mg/kg）槲皮素组（High-dose）。细胞实验:原代培养C57 BL/6J小鼠耳蜗血管纹PCs和内皮细胞（Endothelial cells,ECs）并鉴定;分为（1）Control组和CDDP组;（2）Control组、CDDP组、CDDP+QU（10、20、40μM）组、N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）+CDDP组（3）EC组、EC+PC组、EC+CDDP组、EC+PC+CDDP组、EC+PC+CDDP+QU（10、20、40μM）组和EC+PC+CDDP+NAC组。听性脑干反应（Auditory brainstem response,ABR）检测小鼠听力变化;H＆E染色观察小鼠耳蜗血管纹形态学变化;CCK-8检测各组细胞活力;WST-1和TBA法分别检测超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）活性和丙二醛（Malondialdehyde,MDA）含量;DCFH-DA荧光探针检测PCs上活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的含量;Hoechst 33342和流式细胞术检测PCs的凋亡率;免疫荧光技术检测耳蜗血管纹上PCs的覆盖率和PCs的凋亡和连接相关蛋白分布表达;免疫组化和Western blot技术检测凋亡相关蛋白、线粒体相关蛋白和紧密连接蛋白的表达;Mito SOXTM-red和JC-1检测PCs线粒体功能;依文思蓝（Evans Blue,EB）染色观察血迷路屏障（Blood labyrinth barrier,BLB）的通透性;Millipore Millicell ERS-2电阻仪、Na-Flu（376.27 Da）、FITC-dextran（4 k Da）检测内皮屏障通透性。结果:动物实验:（1）CDDP组听力阈值升高,Ⅰ波潜伏期延长（P＜0.01）;QU能够浓度依赖性降低CDDP模型小鼠听力阈值,缩短Ⅰ波潜伏期（P＜0.05或P＜0.01）。（2）WST-1和TBA结果显示CDDP组小鼠耳蜗内SOD活性降低、MDA含量增加（P＜0.01）;QU浓度依赖性升高CDDP模型小鼠耳蜗内SOD活性,降低MDA含量（P＜0.05,P＜0.01）。（3）H＆E染色可见CDDP组血管纹形态紊乱皱缩,QU可浓度依赖性改善这一现象。（4）免疫组化、荧光和Western blot结果显示,CDDP组凋亡相关蛋白c-Caspase-3、Bax表达升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低;QU下调CDDP模型小鼠血管纹c-Caspase-3和Bax的表达,上调Bcl-2的表达（P＜0.01）。（5）免疫荧光结果显示,CDDP组PCs在血管纹上覆盖率减少（P＜0.01）,QU可增加CDDP模型小鼠血管纹上PCs的覆盖率（P＜0.05）。（6）EB染色显示CDDP组BLB通透性增加,QU浓度依赖性降低小鼠耳蜗BLB的通透性（P＜0.05）;Western blot结果显示,CDDP组ZO-1和VE-cad表达降低（P＜0.01）,QU能够上调CDDP模型小鼠血管纹ZO-1和VE-cad的表达（P＜0.01）。细胞实验:（7）WST-1、TBA法和DCFH-DA荧光探针结果显示,CDDP组PCs内SOD活性降低、MDA和ROS含量增加（P＜0.01）;NAC预处理后PCs内SOD活性升高、MDA和ROS含量减少（P＜0.01）;QU干预后PCs内SOD活性升高、MDA和ROS含量减少,且与剂量相关（P＜0.05或P＜0.01）。（8）免疫荧光和Western blot结果显示,CDDP组c-Caspase-3和Bax表达升高,Bcl-2表达降低（P＜0.01）;NAC可部分逆转CDDP对凋亡相关蛋白的影响（P＜0.01）;QU可部分逆转CDDP对凋亡相关蛋白的影响且与剂量相关（P＜0.05或P＜0.01）;CDDP组线粒体内AIF和Cyt-c释放到胞浆（P＜0.01）,QU和NAC减少CDDP诱导的线粒体AIF和Cyt-c蛋白的释放。（9）Mito SOXTM-red和JC-1结果显示,CDDP组PCs线粒体内ROS含量增加,膜电位下降（P＜0.01）;NAC降低PCs线粒体内ROS含量,增加膜电位;QU浓度依赖性降低PCs线粒体内ROS含量,增加膜电位（P＜0.05或P＜0.01）。（10）Na-Flu、FITC-dextran的通透性和TEER阻值结果显示,EC+PC组内皮屏障较EC组通透性降低,阻值升高（P＜0.01）;CDDP显著增加EC+PC组内皮屏障通透性,阻值显著降低（P＜0.01）;QU逆转CDDP诱导内皮屏障通透性和阻值的变化（P＜0.05或P＜0.01）。（11）EC+PC组较EC组ZO-1和VE-cad蛋白表达升高（P＜0.05）;CDDP显著降低EC+PC组ZO-1和VE-cad蛋白表达（P＜0.01）,QU浓度依赖性上调CDDP诱导ZO-1和VE-cad蛋白表达（P＜0.05或P＜0.01）。此外,CDDP显著降低EC+PC组中PC抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达,升高凋亡相关蛋白c-Caspase-3、Bax的表达（P＜0.01）;QU可浓度依赖性逆转这一改变（P＜0.05或P＜0.01）。结论:CDDP诱导耳蜗内氧化应激升高引起耳蜗血管纹毛细血管PCs线粒体途径的细胞凋亡,而QU可能通过抑制CDDP诱导的PCs凋亡降低BLB的通透性,从而发挥对顺铂耳毒性听力损失的保护作用。