益气活血法对动脉粥样硬化载脂蛋白E基因敲除模型小鼠Toll样受体7影响的探究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jianghulong007
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目的:探究益气活血法对于载脂蛋白E基因敲除小鼠的Toll样受体7及其下游信号分子的影响,从而探讨益气活血法对动脉粥样硬化的防治机制。方法:将40只雄性载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为模型组,阿托伐他汀组,补阳还五汤组,加味补阳还五汤组,每组10只,10只C57BL/6J小鼠作为空白对照组。空白组正常饮食饮水,其余组给予高脂饲料喂养8周。空白组和模型组每日用0.9%NaCl溶液灌胃,阿托伐他汀组,补阳还五汤组及加味补阳还五汤组每日以相应药物灌胃。第9周后采用生化检测方法检测血清甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),低密度脂蛋白(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)。采用苏木素-伊红(HE)染色方法观察,并测量斑块所占管腔面积之比。以实时定量荧光 PCR(Real-time PCR)检测 TLR7 及 MyD88,TRAF-6,NF-κB,IRF7 的 mRNA 表达;蛋白质印迹(Western blot)法测定其蛋白表达。结果:血脂水平,与空白组相比,模型组ApoE-/-小鼠TC,TG,LDL-C水平明显升高(P<0.01),HDL-C水平明显降低(P<0.01);与模型组相比,阿托伐他汀组、补阳还五汤组、加味补阳还五汤组与均能降低ApoE-/-小鼠TC,TG,LDL-C水平,同时升高HDL-C水平(P<0.01);病理学观察,与空白组相比,模型组主动脉内膜增厚、隆起、内皮细胞部分脱落,有大量斑块形成,中膜平滑肌细胞增生;与模型组相比,阿托伐他汀组、补阳还五汤组、加味补阳还五汤组均能有效地改善主动脉细胞的炎性浸润程度和斑块的大小(P<0.01)。mRNA与蛋白水平,与空白组相比,模型组TLR7及MyD88,TRAF-6,NF-κB mRN A与蛋白的表达明显增高(P<0.01),IRF7的mRNA与蛋白变化不具有统计学意义(P>0.05);与模型组相比,阿托伐他汀组、补阳还五汤组、加味补阳还五汤组均能有效降低TLR 7 及 MyD88,TRAF-6,NF-κB mRNA 与蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),而 IRF7 的 mR NA和蛋白的变化不具有统计学意义(P>0.05),阿托伐他汀组、补阳还五汤组、加味补阳还五汤组三组之间的mRNA与蛋白表达的差异也不具有统计学意义(P>0.05)。结论:加味补阳还五汤对于AS的发生发展有抑制作用,其机制可能与抑制TLR7及其下游信号分子的表达有一定相关性。
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