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目的：了解儿科呼吸道感染中肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae，MP)感染情况、肺炎支原体耐药情况及耐药机制。
方法：
1.选取对象：2008年12月～2009年3月北京友谊医院儿科门诊80例呼吸道感染的患儿和2007年11月份～2009年1月份儿科病房200例可能存在肺炎支原体肺炎的患儿。
2.实验方法：
2.1对所有入选对象取其咽拭子，行MP培养，对培养阳性标本应用巢式PCR技术扩增23S rRNA基因，并对扩增产物进行电泳检测及DNA测序分析。
2.2直接对门诊选取对象所取咽拭子应用巢式PCR方法扩增23S rRNA基因、并对扩增产物进行电泳检测及DNA测序分析。
2.3将以上测序结果与NCBI已登录的MP—M129标准株23S rRNA基因作比对，分析肺炎支原体的感染及耐药情况。
3、比较门诊肺炎支原体感染耐药组及敏感组在就诊前是否口服大环内酯类药物方面是否存在差异，将门诊肺炎支原体耐药情况与以往病房肺炎支原体耐药结果数据进行比较，并分析。
结果：
1、80例门诊标本经直接对其咽拭子23S rRNA基因进行巢式PCR扩增、电泳、测序阳性32例，经MP分离培养阳性并经测序鉴定证实MP8例，其中有1例咽拭子培养结果阳性而直接咽拭子PCR结果阴性，最终得到肺炎支原体阳性总数33例，肺炎支原体感染率为41.25％。
2、直接对门诊咽拭子进行巢氏PCR扩增，DNA测序结果与标准株序列相同的共计15例，其余17例存在23S rRNAV区碱基点突变：其中10例存在A2063G突变，3例存在A2064G突变，1例存在A2063T突变，2例存在A2067G突变，1例存在G2062A突变。门诊咽拭子份分离培养阳性标本经巢式PCR测序8例阳性，其中7例存在A2063G突变，1例无突变。通过巢式PCR方法检测门诊肺炎支原体耐药率51.5％。
3、病房200株可能存在肺炎支原体肺炎患儿的咽拭子，经过分离培养及巢式PCR扩增、DNA测序后55株MP阳性，其中52例存在A2063G突变，1例存在A2063T突变，2例存在A2067G突变。
4、两组患儿在就诊前是否口服大环内酯类抗生素方面无差异(P=0.909)。门诊与既往病房肺炎支原体耐药率(通过分子药敏方法检测耐药株38株，敏感株26株)[40]无差异(P=0.459)。
结论：
1、肺炎支原体在冬季高发期感染率高达41.25％，发现耐药突变位点仍以A2063G突变为主，存在少数A2064G突变，新发现了A2063T、A2067G、G2062A位点突变，可能与耐药相关：
2、肺炎支原体耐药与否与患儿近期内是否口服大环内酯类药物无关；
3、通过分子药敏方法检测肺炎支原体耐药率，门诊及病房无差异；分子药敏的方法可以更迅速、敏感的检测肺炎支原体，同时通过检测耐药基因的方法更快的了解其耐药性，指导临床用药。