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马立克氏病(Marek’s Disease,MD)、禽白血病（Avian Leukosis,AL）和网状内皮组织增生症(Reticuloendotheliosis,RE)是家禽常见的病毒性肿瘤病。它们不仅能够引发肿瘤和死亡，而且还能引起感染鸡群的生产性能下降、免疫应答水平降低、对其它疾病更易感等，给家禽养殖业带来巨大经济损失。本研究通过对疑似肿瘤病感染的泰山柴鸡进行病毒的分离鉴定，从同一只鸡体内分离到了马立克氏病病毒(Marek’s Disease Virus,MDV)、禽白血病病毒（Avian LeukosisVirus, ALV）及网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis Virus,REV)；通过ELISA方法检测ALV p27抗原确定鸡群的ALV感染情况；采用PCR方法扩增MDV的致瘤相关基因及ALV、REV的囊膜蛋白（env）基因，通过分析序列确定三种病毒的相关基因的特性及病鸡存在不同亚型的ALV的共感染；最后，为验证分离到的病毒是否具有生物学活性，本研究进行了动物回归实验，并从攻毒组的鸡血液中成功分离鉴定出了这三种肿瘤病病毒。具体研究结果如下：1三种肿瘤病病毒的分离鉴定本研究根据病鸡的临床及剖检症状，初步判定为肿瘤病感染，并进行了病毒的分离鉴定。将病鸡的白细胞接种鸡胚成纤维细胞（CEF）分离病毒，采用间接免疫荧光试验（IFA）鉴定出了MDV、ALV及REV。其中，用MDV单克隆抗体BA4、H19均得到了阳性的结果，其中H19单抗的IFA结果阳性证明分离到的为强毒株MDV；利用J亚群ALV（ALV-J）的单克隆抗体JE9确定分离到了ALV-J，同时，用ELISA方法检测采集的泰山柴鸡鸡群棉拭子及卵白样品的ALV p27抗原，阳性率为65.5%（553/844）,结果表明泰山柴鸡中存在较严重的ALV感染；用针对REV的单克隆抗体11B118检测确定有REV感染。通过病毒的分离及IFA鉴定发现同一只泰山柴鸡体内存在MDV、ALV及REV的共感染，命名为SD110503。同时扩增了三种肿瘤病病毒的相关基因，测序结果验证了上述IFA结论，并且证实了存在不同亚型ALV的共感染。2三种肿瘤病病毒相关基因序列分析MDV meq、pp24及pp38基因序列分析结果表明，MDV meq、pp24及pp38基因与国内外参考毒株序列的同源性分别为98.3%-99.0%、96.6%及98.1%-99.8%。分析碱基序列发现meq基因第575-577位的碱基为CAC，为强毒株的特征；pp24基因序列第81位碱基为C，证明此株源于国外，最可能来自CVI988；pp38基因第320位碱基为G，对应第107位氨基酸为精氨酸（R），第326位碱基为G，对应第109位氨基酸为甘氨酸（G），为疫苗株。综合上述碱基分析结果可判定此病毒为基因突变或者重组的强毒株。ALV env基因序列分析显示扩增出的ALV-J（SD110503J）env基因与已发表的国内外参考株env基因之间的同源性为84.1%-94.4%；进化树的结果显示SD110503J株与SD07LK01株的进化关系最近；扩增到的ALV-A （SD110503A、SD110503A1）env基因与已发表的ALV(A、B、C、D、E亚型)序列同源性为70.6-88.4%，基因进化树结果表明这扩增出的两个毒株与RSA-A的亲缘关系最近，均为ALV-A；扩增出来的ALV-C（SD110503C）毒株env基因与已发表的序列同源为82.5-95.2%，进化树结果显示此毒株TW-3593株同源性最近，本序列为ALV-C的gp85和ALV-E的gp37重组形成。上述结果表明，SD110503中存在不同亚型的ALV共感染，并且存在不同亚型之间基因重组现象。REV env基因序列分析表明扩增出来的SD110503REV env基因序列与已发表的REV序列同源性分别为94.4-99.3%，基因进化树结果表明此毒株与HLJR0901的亲缘关系最近。3动物回归实验SD110503混合毒攻毒试验结果可知，从攻毒组SPF鸡血液中均能分离到MDV、ALV及REV，经IFA试验可确定检测的样品为阳性，这表明SD110503可以感染SPF鸡，对下一步的研究奠定基础。