【摘 要】
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目的:基于网络药理学和实验分析槲皮素对口腔扁平苔藓免疫干预研究,通过分析网络药理学结果,以及体外研究槲皮素对口腔扁平苔藓患者外周血淋巴细胞增殖、凋亡、迁移的影响及对白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）、干扰素-γ（Interferon-γ,IFN-γ）细胞因子分泌水平的变化,以期为进一步探讨槲皮素治疗口腔扁平苔藓的相关机制研究提供实验依据。方法:通过中药系统药理学数据库和分析平台
【基金项目】
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国家自然科学基金项目“趋化因子免疫调控网络系统在口腔扁平苔藓发病机制的作用”（编号 81470748）; 江苏高校优势学科建设工程资助项目（No. PAPD 2018-87）
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目的:基于网络药理学和实验分析槲皮素对口腔扁平苔藓免疫干预研究,通过分析网络药理学结果,以及体外研究槲皮素对口腔扁平苔藓患者外周血淋巴细胞增殖、凋亡、迁移的影响及对白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）、干扰素-γ（Interferon-γ,IFN-γ）细胞因子分泌水平的变化,以期为进一步探讨槲皮素治疗口腔扁平苔藓的相关机制研究提供实验依据。方法:通过中药系统药理学数据库和分析平台（Traditional Chinese Medicine Sys tems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP）检索并筛选槲皮素药物作用靶点,并引用Uniprot数据库查询靶点对应基因,之后用京都基因与基因组百科全书分析（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）及基因本体（Gene Ontology,GO）富集分析预测槲皮素治疗口腔扁平苔藓的可能作用机制,运用Cytoscape3.8.0建立药物-疾病-通路-靶点网络图;根据网络药理学分析结果,选取斑纹型口腔扁平苔藓患者、糜烂型口腔扁平苔藓患者以及正常健康志愿者各15例,提取并分离外周血T淋巴细胞（Peripheral blood T lymphocyt e,PBL T）,通过CCK8、流式技术及细胞迁移实验分别检测槲皮素对淋巴细胞增殖、凋亡、迁移的影响,并通过酶联反应吸附测定（Enzyme-linked immunos orbent assay,ELISA）检测槲皮素对IL-6、IFN-γ细胞因子分泌水平的影响。结果:通过TCMSP筛选槲皮素对应靶点共75个,口腔扁平苔藓疾病差异基因共6110个,筛选出66个共有靶点对应的差异基因,共富集到116条信号通路,其中关键通路为AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路、HIF-1信号通路等;富集到1474条生物过程,其中较关键的生物过程为活性氧代谢反应、活性氧的刺激作用反应、细胞化学应激反应等;在基础实验研究中,通过不同浓度槲皮素对细胞作用的不同结果,可知当浓度为10μM时,对口腔扁平苔藓患者外周血T淋巴细胞有明显的增殖及迁移作用,当浓度升至40μM时,槲皮素对T淋巴细胞的凋亡出现明显的作用,而对于酶联反应吸附测定法检测法的结果中可知,槲皮素对外周血T淋巴细胞中IL-6分泌的抑制作用及对IFN-γ分泌的促进作用随槲皮素浓度的升高而愈发显著。结论:综合网络药理学及体外实验研究显示,槲皮素可能通过调节OLP患者外周血Th1和Th2细胞的平衡,以及影响相关细胞因子的分泌,从而干预了口腔扁平苔藓疾病的发生发展过程。
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