【摘 要】
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目前,关于葡萄酿酒酵母菌的研究不仅局限于酿酒酵母菌,非酿酒酵母菌逐渐的成为了国内外主要研究对象。利用贺兰山东麓良好的地理资源优势,分离出当地具有代表性特色的非酿酒酵母菌是目前当地的研究重点之一。本次研究对象主要是以贺兰山东麓地区五个子产区的赤霞珠葡萄为原材料,对其在自然发酵过程中分离出的非酿酒酵母菌株进行WLN培养基形态分类和26S r DNAD1/D2区序列分析进行鉴定,并通过Tandem re
【基金项目】
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宁夏回族自治区重点研发计划项目（2022BBF02015）； 国家自然科学基金（31960473）；
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目前,关于葡萄酿酒酵母菌的研究不仅局限于酿酒酵母菌,非酿酒酵母菌逐渐的成为了国内外主要研究对象。利用贺兰山东麓良好的地理资源优势,分离出当地具有代表性特色的非酿酒酵母菌是目前当地的研究重点之一。本次研究对象主要是以贺兰山东麓地区五个子产区的赤霞珠葡萄为原材料,对其在自然发酵过程中分离出的非酿酒酵母菌株进行WLN培养基形态分类和26S r DNAD1/D2区序列分析进行鉴定,并通过Tandem repeat-tRNA（TRtRNA）指纹图谱法对非酿酒酵母菌株进行种间及种内分子指纹图谱的分析,研究结果如下。（1）贺兰山东麓五个葡萄酒子产区中共分离出524株非酿酒酵母菌株,利用WLN培养基形态分类和26S rDNA D1/D2区序列分析进行菌种鉴定,将其归为10属19种:Hanseniaspora uvarum、Metschnikowia pimensis、Metschnikowia pulcherrima、Cryptococcus sp.、Cryptococcus albidus、Cryptococcus flavescens、Cystofilobasidium ferigula、Cryptococcus terrestris、Rhodotorula glutinis、Naganishia albida、Candida zemplinina、Pichia kluyveri、Pichia kudriavzevii、Rhodotorula graminis、Aureobasidium pullulans、Filobasidium magnum、Filobasidium sp、Cryptococcus magnus、Filobasidium elegans。（2）石嘴山产区的酵母菌种有7属11种,占总酵母菌种数量的57.89%。青铜峡产区的酵母菌有5属10种,占总酵母菌种数量的52.63%;银川产区的酵母菌有8属8种,占总酵母菌种数量的42.11%;红寺堡产区的酵母菌有3属4种,占总酵母菌种数量的21.05%;玉泉营产区的酵母菌有3属3种,占总酵母菌种数量的15.79%。银川产区独有的酵母菌种有2属2种,即:R.graminis和A.pullulans,石嘴山产区独有的酵母菌种有4属4种,即:C.ferigula、C.terrestris、R.glutinis、N.albida,青铜峡产区独有的酵母菌种有2属3种,即:Filobasidium sp.、C.magnus和F.elegans,红寺堡产区独有的酵母菌种仅为1属1种,即:P.kudriavzevii。银川、石嘴山、青铜峡、玉泉营、红寺堡五个产区均分离出H.uvarum和M.pulcherrima酵母菌种,其中H.uvarum是五个子产区中的优势菌种。其中,本次从自然发酵的赤霞珠葡萄酒上到能够分离到的酵母菌新种有18株,占分离总菌种数量为3.44%。（3）将传统方法和分子生物学方法相结合可以有效实现非酿酒酵母菌种间及种内水平的研究。引物对TtRNASC和5CAG将全部的非酿酒酵母菌株分为31类,引物对TtRNASC和ISSR-MB全部的非酿酒酵母分为37类,N.albida未显示指纹图谱。Cryptococcus等酵母菌在两组微卫星引物对中种间区分效果相同;而H.uvarum等酵母菌在引物对二中的种内区分效果要高于引物对一。10属19种非酿酒酵母菌在两组微卫星引物指纹图谱中展现了一定的种间及种内差异,说明贺兰山东麓赤霞珠葡萄自然发酵过程中分离到的H.uvarum,C.zemplinina,Cryptococcus酵母菌株种内菌株遗传多样性丰富,而M.pulcherrima,Cystofilobasidium,Pichia等酵母菌种内菌株遗传多样性相对单一。
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