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猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome，PRRS）是由属于套式病毒目动脉炎病毒科属的猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive andRespiratory Syndrome virus，PRRSV）感染引起的一种高度接触性传染病。该病以母猪繁殖障碍、各年龄段猪呼吸系统障碍、哺乳仔猪高死亡率、免疫抑制和持续性感染等为主要特征。PRRS目前已经遍及全球主要以养猪业为主的国家和地区，且给世界养猪业造成了巨大的经济损失。PRRSV与宿主细胞膜上的特异性受体结合是其完成感染的第一步。现已报道的位于Marc-145细胞上的PRRSV细胞受体有清道夫受体蛋白（CD163）和波形蛋白（Vimentin），不存在唾液酸粘附素（Sn）。其中属于富含半胱氨酸超家族的清道夫受体CD163在促进病毒脱壳和将基因组RNA释放到细胞质过程中发挥作用。此外，另一个可能的PRRSV细胞受体为非肌肉肌球蛋白II型重链A（Non-myscle myosin II-A，NMHC II-A）。NMHC II-A是本实验室通过免疫共沉淀用针对PRRSV GP5蛋白的单克隆抗独特型抗体（Mab2-5G2）从猪肺泡巨噬细胞（PAM）和Marc-145中提取得到并进行质谱分析获得。CD163是Calvert等人于2007鉴定的PRRSV的一种细胞受体。CD163分子由9个富含半胱氨酸结构域（SRCR1~9）组成，有研究发现CD163SRCR5是CD163作为PRRSV细胞受体的主要结构域，其在介导PRRSV感染过程中与PRRSV的GP2a和GP4蛋白结合。有研究指出，用CD163免疫血清处理猪肺泡巨噬细胞可部分阻断PRRSV感染，但对于具体的作用区域并没有深入的研究。迄今，CD163各SRCRs在PRRSV感染过程中与病毒及其它受体之间的相互作用还没有深入的探究。为了获得原核表达的CD163-1、CD163-2蛋白和其免疫血清及单克隆抗CD163抗体，并鉴定CD163重组蛋白，免疫血清和单抗在PRRSV感染Marc-145细胞过程中的作用。本研究原核表达了截短的CD163蛋白（SRCR1~4和SRCR5~6，分别命名为CD163-1和CD163-2），制备了抗CD163-1、CD163-2的小鼠免疫血清和单克隆抗CD163抗体。通过ELISA、Western-blot和IFA等实验检测了制备的蛋白、血清和单克隆抗体的生物学活性。结果显示，CD163-1和CD163-2两段原核重组蛋白均能结合Marc-145细胞，但不阻断PRRSV感染Marc-145细胞。针对两段原核重组蛋白的免疫血清不仅能与Marc-145细胞结合，且针对CD163-2的免疫血清能部分阻断PRRSV感染Marc-145细胞。抗CD163的单克隆抗体能识别猪源CD163但不能识别猴源CD163。本研究原核表达了CD163重组蛋白并制备了其免疫血清和单克隆抗体。针对CD163SRCR5~6的免疫血清可部分阻断PRRSV感染Marc-145细胞，说明CD163SRCR5~6在PRRSV感染Marc-145过程中发挥重要作用。本研究为进一步研究CD163各SRCRs在PRRSV感染过程中的作用奠定了基础。