不同血清型副鸡嗜血杆菌差异的比较

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副鸡嗜血杆菌是引起鸡传染性鼻炎的病原体,分为A、B、C三个血清型,本菌兼性厌氧,可以引起急性呼吸道病。可导致蛋鸡产蛋率和孵化率下降,从而造成严重的经济损失。目的:通过研究不同血清型副鸡嗜血杆菌在生长特性、致病性、敏感性和外膜蛋白方面的差异,为临床诊疗、B型菌疫苗的研制和从蛋白组学进一步研究该菌提供了技术保障。方法:将菌种在TSA培养基上厌氧培养24h,然后挑取单个菌落在TSB培养基中培养16h,待培养基变浑浊时开始测OD600,每隔2h测一次,进行记录。将117只未接种过传鼻疫苗的蛋鸡分为三组,每只鸡眶下窦注射已培养12h的菌液0.25ml,每一组攻一个血清型,24h后开始观察发病情况。将125、62.5、32、16、8 mg/ ml连翘提取物分别加入到已有10ml液体培养基的试管后,再向每管中接入已活化的对应菌0.1ml,将试管置于37℃恒温摇床中培养,每间隔2h测定并记录OD600值。将已培养好的菌液进行冰浴、离心、重悬、超声破碎等提取其外膜蛋白,然后将外膜蛋白进行等电聚焦、SDS-PAGE,得到不同血清型的双向电泳图。结果:通过生长特性实验发现,B和C型副鸡嗜血杆菌的OD600在12h到达最高峰,而A型菌则在10h到达高峰,然后开始下降。通过致病性实验发现,C型菌的持续感染能力最强,B型菌次之,A型菌最弱。通过对药物敏感性实验发现,A、B型菌的最佳抑菌浓度为32mg/ml,而C的为16mg/ml。通过不同血清型外膜蛋白的双向电泳图发现,不同血清型外膜蛋白的结构有着明显的差异。结论:不同血清型的副鸡嗜血杆菌在生长特性、致病性、敏感性和外膜蛋白方面有着比较大差异性。
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