【摘 要】
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目的:、肺腺癌（lung adenocarcinoma,LUAD）占肺癌的40%以上,是临床最难治愈的肿瘤,鉴定在LUAD发生发展中起作用的蛋白质将有助于阐明发病机理并提供新的预后生物标志物。课题组前期构建了高表达ANKRD49的慢病毒载体LV5-ANKRD49,将其感染H1299细胞后,发现其不参与调节细胞增殖,但是可以促进H1299细胞的迁移和侵袭。为研究ANKRD49在H1299细胞迁移和侵
【基金项目】
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山西省回国留学人员科研资助项目（编号:HGKY2019056）；
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目的:、肺腺癌（lung adenocarcinoma,LUAD）占肺癌的40%以上,是临床最难治愈的肿瘤,鉴定在LUAD发生发展中起作用的蛋白质将有助于阐明发病机理并提供新的预后生物标志物。课题组前期构建了高表达ANKRD49的慢病毒载体LV5-ANKRD49,将其感染H1299细胞后,发现其不参与调节细胞增殖,但是可以促进H1299细胞的迁移和侵袭。为研究ANKRD49在H1299细胞迁移和侵袭中发挥的作用,应用Realtime q PCR和Western blotting检测迁移和侵袭相关蛋白的表达,为下一步研究ANKRD49在NSCLC中的功能奠定基础。方法:本研究利用组织芯片和免疫组织化学技术,在肺腺癌（LUAD）与成对的非肿瘤肺组织中分析ANKRD49蛋白的表达情况;使用χ2检验和Spearman相关分析研究ANKRD49表达与肺腺癌患者临床病理特征之间的相关性;ANKRD49与患者生存率之间的关联使用Kaplan-Meier方法和对数秩检验进行分析;使用Cox比例风险模型评估ANKRD49在肺腺癌患者的预后价值;使用Real-time q PCR和Western blotting检测ANKRD49过表达NCI-H1299细胞系中MMP-2/9,TIMP-1/2的m RNA和蛋白质表达水平;明胶酶谱实验检测ANKRD49过表达NCI-H1299细胞系中MMP-2/9酶活性;使用Western blotting检测ANKRD49过表达NCI-H1299细胞系中SAPK/JNK信号通路中相关蛋白的表达;提取细胞浆以及细胞核蛋白,研究相关转录因子的核易位。结果:LUAD中ANKRD49升高,与肿瘤淋巴结转移、远端转移和分化程度呈正相关;高水平表达的ANKRD49患者的生存率明显低于低水平ANKRD49患者;Cox模型表明,肺组织中较高的ANKRD49可以用作LUAD患者独立的预后指标;Real-time q PCR和Western blotting结果显示,与对照组相比,ANKRD49高表达组的NCI-H1299细胞中MMP-2/9的m RNA水平及蛋白质水平明显升高,而TIMP-1/2的m RNA水平及蛋白水平明显下降;明胶酶谱实验结果表明,ANKRD49高表达后可促进MMP-2/9的酶活性;Western blotting结果显示,ANKRD49过表达后,JNK、ERK、P38的总蛋白水平无明显变化,但JNK、P38的磷酸化水平明显升高;提取细胞浆、细胞核结果显示,ANKRD49过表达后转录因子ATF2、c-jun核易位增加。结论:临床标本通过组织芯片和免疫组织化学染色表明ANKRD49可以作为评估LUAD预后的潜在生物标志物,并可以作为LUAD治疗的潜在治疗靶标;体外细胞实验表明ANKRD49过表达后,对NCI-H1299细胞的增殖能力无影响。ANKRD49高表达组明胶酶A（MMP-2）、明胶酶B（MMP-9）的酶活性升高。ANKRD49过表达后,通过JNK-AP1/ATF2信号通路上调MMP-2、MMP-9促进NCI-H1299细胞的迁移和侵袭能力。
其他文献
目的:近红外荧光探针因可避免生物背景荧光干扰、组织穿透能力强、光损伤小的优点而被用于生物传感和肿瘤诊疗一体化的研究。硝基还原酶（NTR）在肿瘤缺氧状态下过表达,被视为重要的肿瘤标志物,是研究肿瘤诊断和治疗的潜在靶点。因此发展NTR激活的近红外探针对于恶性肿瘤的诊断和治疗非常重要。而氟离子（F-）对人体健康而言是一把“双刃剑”,摄入不足会导致龋齿、骨质疏松;而摄入过量会导致氟中毒,诱发一系列疾病。因
目的:1、探究胃癌患者血浆外泌体PD-L1（ePD-L1）是否与疾病发展程度相关。2、探究胃癌患者血浆ePD-L1是否能够抑制T细胞活化。方法:1、使用外泌体纯化试剂纯化胃癌患者血浆中的外泌体。2、利用纳米粒子跟踪分析（NTA）技术和NanoSight NS300颗粒跟踪分析仪分析囊泡的数量以及大小;电镜观察外泌体超微结构;共聚焦荧光显微镜观察外泌体颗粒上特异标记的CD63和PD-L1抗原。3、利
背景:主要组织相容性复合体Ⅰ（major histocompatibility complex-Ⅰ,MHC-Ⅰ）可将肿瘤相关抗原呈递至CD8+T细胞,诱导CD8+T细胞杀伤肿瘤细胞。研究表明,肿瘤细胞表面MHC-Ⅰ表达下调是引起肿瘤免疫逃逸的重要机制之一。因此影响MHC-Ⅰ组装和表达的关键蛋白,其异常表达有可能导致肿瘤免疫逃逸的发生。钙连接蛋白（Calnexin,CANX）在抗原提呈过程中作为伴侣
目的:食管癌是全球范围内常见的消化道恶性肿瘤,而中国是食管癌高发国家,其发病率和死亡率居高不下,约占全球的一半;在国内,山西又是食管癌高发地区。碳纳米点（碳点）因其具有突出的光致发光性能,良好的生物相容性及表面富含官能团易功能化等特点,备受科研工作者关注,已被广泛应用到了传感、生物成像和药物递送等各个领域。针对临床上食管癌治疗手段单一且预后差等问题,本文充分利用碳点的优点负载化疗药物、光敏剂以及靶
目的:1.探究IQGAP1（IQ motif containing GTPase activating protein 1）对食管鳞癌细胞迁移和侵袭的影响。2.探究IQGAP1对MMP-2基因表达和活性的影响。3.探究IQGAP1影响食管鳞癌细胞迁移和侵袭以及MMP-2基因表达和活性的分子机制。方法:1.将GFP-IQGAP1质粒和对照组空载质粒转染至EC9706细胞中,将IQGAP1短发卡RNA
目的:检测食管胃结合部腺癌（adenocarcinoma of the esophagogastric junction,AEG）患者基因突变情况,分析内披蛋白（Involucrin,IVL）突变对肿瘤细胞生物学功能的影响。方法:1.山西地区AEG患者全外显子组测序和ivl突变分析收集山西省肿瘤医院普通外科手术切除的22例山西地区AEG患者的癌组织和癌旁组织,运用二代测序技术进行全外显子组测序,分
目的:应用生物信息学方法分析纤维蛋白原样蛋白2（Fibrinogen-like Protein 2,FGL2）与胶质瘤的关系,探讨FGL2在胶质瘤中的潜在预后价值和免疫治疗的靶向性。方法:使用TCGA、GETx和GEO数据库分析FGL2在胶质瘤组织中的转录水平,通过TCGA数据库中低级别胶质瘤和胶质母细胞瘤（Glioblastoma,GBM）患者的临床资料,分析FGL2的表达与临床病理特征的关系。
目的:探究信号转导和转录激活因子STAT5A及STAT5B在T淋巴母细胞淋巴瘤（T-cell lymphoblastic lymphoma,T-LBL）中的表达,从m RNA和蛋白水平分析STAT5A及STAT5B与疾病的发生、发展以及生存预后之间的关系,为T淋巴母细胞淋巴瘤的临床诊断和治疗提供新的潜在靶点。方法:（1）采用免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）的方法检测
背景与目的:乳腺癌是全球女性癌症相关死亡的第二大原因,近年发病率持续上升。转移和复发是乳腺癌患者死亡的主要原因,严重危害患者生命健康。转移性乳腺癌易复发、预后差,生存期仅8个月至3年。因此,探寻转移相关的关键分子对提高转移性乳腺癌患者的生存率具有重要意义。非肌肉肌球蛋白ⅡA（Non-muscle myosin ⅡA,NMⅡA）是细胞的肌动蛋白骨架之一,与细胞的迁移、收缩以及胞质分裂等密切相关。近年
目的:利用体内噬菌体展示技术筛选与人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞结合的小分子多肽并在体内外鉴定其结合特异性及靶向性。方法:1.将人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞接种于裸鼠体内,制备荷瘤裸鼠模型,用噬菌体展示随机环七肽库对荷瘤裸鼠进行3轮体内筛选。免疫组织化学法鉴定噬菌体在肿瘤组织及正常对照组织的分布情况,酶联免疫吸附实验（ELISA）检测噬菌体克隆对NCI-H1299细胞的结合亲和力,鉴