论文部分内容阅读
炎症是机体免疫应答的启动和活化的一种先天防御机制，过度的炎症反应会造成器官功能损害，进而引发全身炎症反应综合征，甚至威胁生命。炎症反应是一个复杂而重要的生物学过程，大部分创伤、疾病的发生和发展都与之相关。研究表明，炎症主要是机体对伤、病介导的各类免疫应答的外在表现，涉及到免疫功能的方方面面，包括固有免疫(又称非特异性免疫、天然免疫)和适应性免疫(又称特异性免疫、获得性免疫)，其中适应性免疫又分为体液免疫和细胞免疫。因此，对机体炎症的精准调控必须与免疫系统的作用结合起来，才能进一步纠正后续机体的病理性损伤，维护内环境稳定。
炎症性肠病(inflammatory bowel disease，IBD)是累及回肠、结肠和直肠的一种慢性、复发性胃肠道疾病，是炎症性疾病的典型代表。虽然其治疗方法多样，但因其发病机制仍在拓展中，而且影响因素多样，往往局限了有效防治理论和技术的发展。目前IBD的发病率不断攀升，已经逐步发展为全球性疾病，危害不容忽视。因此，基于黏膜免疫系统在肠道屏障中的重要性，系统探索IBD发生后该系统免疫细胞的干预因素和调控机制可以为有效防治IBD提供新的免疫调理策略。
我们的前期工作发现，新型转录因子Musculin能够影响调节型T细胞(regulatory T cell，Treg)-辅助型T细胞(helper T cell，Th)17平衡；在初始T细胞(Na?ve T cell， Th0)体外定向诱导实验中，用白细胞介素(interleukin，IL)-23刺激Musculin敲除小鼠来源的Th0后，IL-17A和IL-17F的表达显著降低；在葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium，DSS)诱导的小鼠IBD模型研究中，Musculin敲除(knockout，KO，-/-)组小鼠的死亡率低于Musculine正常(即野生型，wildtype，WT，+/+)组小鼠，而且Musculin缺失可以影响小鼠肠道集合淋巴结(peyer’ s patch，PP)中IL-22、IL-10和叉状头转录因子家族成员3(forkhead box P3，Foxp3)的表达。上述结果提示，Musculin不仅影响T细胞的功能，并且可能在肠道炎症反应中发挥了重要作用。本研究首先检测了小鼠中枢免疫器官(包括骨髓和胸腺)和周围免疫器官(包括脾和淋巴结)中Musculin的表达情况，然后使用Musculin抑制剂-曲古抑菌素A(trichostatin A，TSA)研究其对高表达Musculin的小鼠免疫器官分泌功能的影响，结果表明小鼠周围淋巴结(peripheral lymph nodes，LN)高表达Musculin(P﹤0.01)，且TSA能够抑制脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)刺激后LN细胞的分泌功能，其机制可能与Musculin调控IL-17A和IL-22的表达变化有关。接着，为了进一步研究MusculinKO小鼠对伤、病介导炎症反应和免疫功能的影响，我们通过条件性敲除打靶策略成功制备Musculinfl/flloxp小鼠(本研究仅利用其MusculinKO属性)。通过该小鼠分别与Foxp3-绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)敲入(knockin，KI)小鼠和维甲酸相关孤核受体γt(retinoidrelatedorphannuclearreceptorγt，RORγt)-GFPKI小鼠繁育，制备出MusculinKO-Foxp3-GFPKI小鼠、MusculinKO-RORγt-GFPKI+/+基因小鼠，并确保上述品系小鼠生长状态良好，繁育正常。另外，我们通过DSS诱导IBD模型，探究Musculin对IBD病理进程的影响，结果发现Musculin缺失后可以促进肠道过度炎症反应，加重结肠上皮损伤，这可能与Musculin调控肠系膜淋巴结(mesenteric lymph nodes，MLN)中3型天然淋巴细胞(group 3 innate lymphoid cell，ILC3)对IL-22和IL-17A的分泌有关。本研究首次将IBD发生后Musculin与肠道黏膜免疫系统的关系结合起来，可为有效延缓甚至阻止肠道炎症反应进程和不良预后提供新的治疗思路和干预靶点。
炎症性肠病(inflammatory bowel disease，IBD)是累及回肠、结肠和直肠的一种慢性、复发性胃肠道疾病，是炎症性疾病的典型代表。虽然其治疗方法多样，但因其发病机制仍在拓展中，而且影响因素多样，往往局限了有效防治理论和技术的发展。目前IBD的发病率不断攀升，已经逐步发展为全球性疾病，危害不容忽视。因此，基于黏膜免疫系统在肠道屏障中的重要性，系统探索IBD发生后该系统免疫细胞的干预因素和调控机制可以为有效防治IBD提供新的免疫调理策略。
我们的前期工作发现，新型转录因子Musculin能够影响调节型T细胞(regulatory T cell，Treg)-辅助型T细胞(helper T cell，Th)17平衡；在初始T细胞(Na?ve T cell， Th0)体外定向诱导实验中，用白细胞介素(interleukin，IL)-23刺激Musculin敲除小鼠来源的Th0后，IL-17A和IL-17F的表达显著降低；在葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium，DSS)诱导的小鼠IBD模型研究中，Musculin敲除(knockout，KO，-/-)组小鼠的死亡率低于Musculine正常(即野生型，wildtype，WT，+/+)组小鼠，而且Musculin缺失可以影响小鼠肠道集合淋巴结(peyer’ s patch，PP)中IL-22、IL-10和叉状头转录因子家族成员3(forkhead box P3，Foxp3)的表达。上述结果提示，Musculin不仅影响T细胞的功能，并且可能在肠道炎症反应中发挥了重要作用。本研究首先检测了小鼠中枢免疫器官(包括骨髓和胸腺)和周围免疫器官(包括脾和淋巴结)中Musculin的表达情况，然后使用Musculin抑制剂-曲古抑菌素A(trichostatin A，TSA)研究其对高表达Musculin的小鼠免疫器官分泌功能的影响，结果表明小鼠周围淋巴结(peripheral lymph nodes，LN)高表达Musculin(P﹤0.01)，且TSA能够抑制脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)刺激后LN细胞的分泌功能，其机制可能与Musculin调控IL-17A和IL-22的表达变化有关。接着，为了进一步研究MusculinKO小鼠对伤、病介导炎症反应和免疫功能的影响，我们通过条件性敲除打靶策略成功制备Musculinfl/flloxp小鼠(本研究仅利用其MusculinKO属性)。通过该小鼠分别与Foxp3-绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)敲入(knockin，KI)小鼠和维甲酸相关孤核受体γt(retinoidrelatedorphannuclearreceptorγt，RORγt)-GFPKI小鼠繁育，制备出MusculinKO-Foxp3-GFPKI小鼠、MusculinKO-RORγt-GFPKI+/+基因小鼠，并确保上述品系小鼠生长状态良好，繁育正常。另外，我们通过DSS诱导IBD模型，探究Musculin对IBD病理进程的影响，结果发现Musculin缺失后可以促进肠道过度炎症反应，加重结肠上皮损伤，这可能与Musculin调控肠系膜淋巴结(mesenteric lymph nodes，MLN)中3型天然淋巴细胞(group 3 innate lymphoid cell，ILC3)对IL-22和IL-17A的分泌有关。本研究首次将IBD发生后Musculin与肠道黏膜免疫系统的关系结合起来，可为有效延缓甚至阻止肠道炎症反应进程和不良预后提供新的治疗思路和干预靶点。