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BYD病毒(Bai Yang Dian virus)是我国新发现的一种新型黄病毒,可引起病鸭体温升高,采食量减少,产蛋率下降和腹泻等症状。本论文首次从广东地区幼鹅体内分离到鹅源黄病毒,对其进行了动物回归实验,利用巢式RT-PCR方法进行了分子鉴定,并通过分段降落RT-PCR方法进行了全基因组测序。 首先从广东鹤山市某鹅场发病的幼鹅群中无菌采集病料,利用番鸭胚尿囊腔接种进行病毒的分离传代。通过微量血凝试验发现,在pH值为7.2的条件下所分离的毒株不凝集鸭、鸡、鹅、鸽的红细胞;并且该病毒对番鸭胚的半数致死量(ELD50)为5×10-2.68mL-1;将培养的病毒人工感染15日龄健康幼鹅能复制出与自然病例相同的临床症状和病变,幼鹅接种后72 h开始发病,14 d死亡3羽(3/10)。用BYD病毒E基因片段的特异性引物,对实验获得毒株进行RT-PCR扩增和进一步的巢式PCR鉴定,扩增产物经过克隆、连接转化、测序和序列分析,证明获得的序列与GenBank中收录的鸭BYD病毒(登录号为JF312912)和鹅黄病毒JS804株(登录号为JF895923)的一致性最高(仅2个碱基的差异),均达到了99%以上。因此,将实验获得的毒株暂定为鹅源BYD病毒广东株1(简称为BYD-GD1)。 然后对BYD-GD1全基因组分8个段进行降落RT-PCR扩增、序列测定与分析,结果表明BYD-GD1全基因组长10278 bp,共编码3425个氨基酸,该病毒与GenBank中坦布苏病毒JM株、JS804株和FS株以及BYD病毒的核苷酸序列同源性均达99%以上。系统进化树分析表明,BYD-GD1株与GenBank中坦布苏病毒同在一个分支,推测BYD-GD1和该病毒可能源于共同的祖先。而且BYD-GD1与Bagaza病毒(宿主是蚊子)在保守的E基因和全基因组的系统进化树中处于同一亚分支,提示鹅源黄病毒的发生和流行可能与吸血昆虫的传播有关。 本试验首次从广东分离到鹅源黄病毒BYD-GD1毒株,获得了该病毒的全基因组序列,这不仅为鹅黄病毒的病原特征、致病机理及流行病学调查提供了宝贵的资料,同时也为鹅源黄病毒病的疫苗研究和快速检测方法的建立奠定了重要的基础。