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目的:观察电针长强穴对FMR1基因敲除小鼠不同脑区CREB蛋白表达的影响,以探讨针刺的多脑区效应。方法:将24只48日龄FMR1基因敲除小鼠随机分为空白组、电针长强组、电针非经非穴组各8只。电针长强组均采用韩氏电针仪连接针灸针,刺激参数为2 Hz频率,连续波,强度为1~3 mA,持续时间20 min;电针非经非穴组于肋弓最低处1cm进针;空白组除模拟针刺过程中的抓取动作外,不进行其他操作。各组小鼠均连续干预14天后,于第15天取材。所有分组于干预前后进行自主行为学检测,分别检测小鼠干预前后的粪便数和活动量。干预结束后取皮质区、小脑区和海马区组织,使用免疫组化法和Western blot法检测CREB、ERK和p-CREB蛋白的表达。本课题采用SPSS 22.0软件对数据进行比较与分析,计量资料符合正态分布,统计方法选用单因素方差分析方法(one-way ANOVA),数据均进行双验,P<0.05则说明其差异具有统计学意义,最后使用Graphpad Pri sm进行统计绘图。结果:(1)自主行为学检测结果表明电针长强组与空白组及电针非经非穴组比,活动量增加,活跃度增强,有显著性差异(P<0.05)。(2)各脑区免疫组化法检测结果表明在皮质区,电针长强组CREB阳性细胞平均光密度值较空白组增加,具有显著差异(P<0.05);而三组间的p-CREB阳性细胞平均光密度值较为平均,无显著性差异(P>0.05);同时电针非经非穴组的ERK阳性细胞平均光密度值较空白组及电针长强组减少,具有显著性差异(P<0.05)。小脑区三组间的CREB和p-CREB阳性细胞平均光密度值都较为平均,无显著性差异(P>0.05);而电针长强组ERK阳性细胞平均光密度值较电针非经非穴组增加,有显著性差异(P<0.05)。海马区空白组CREB阳性细胞平均光密度值较电针非经非穴组及电针长强组增加,有显著性差异(P<0.05);而海马区三组间的ERK和p-CREB阳性细胞平均光密度值都较为平均,无显著性差异(P>0.05)。(3)各脑区Western blot法检测结果表明在皮质区,CREB蛋白表达电针非经非穴组及电针长强组较空白组升高,具有显著性差异(P<0.05),同时电针长强组的ERK和p-CREB蛋白表达较空白组及电针非经非穴组升高,具有显著性差异(P<0.05)。小脑区电针长强组的CREB和ERK蛋白表达较空白组及电针非经非穴组升高,具有显著性差异(P<0.05);同时,三组间的p-CREB蛋白表达相似,无显著性差异(P>0.05)。海马区电针非经非穴组的CREB蛋白表达较空白组及电针长强组降低,具有显著性差异(P<0.05);而空白组的ERK蛋白和p-CREB蛋白表达较电针非经非穴组及电针长强组升高,且有显著性差异(P<0.05)。结论:(1)电针长强穴能相应地提高皮质区及小脑区CREB及ERK的表达且与行为学结果相一致。(2)电针刺激长强穴的干预方式在多个脑区的联合效应中,能相应地强化皮质区及小脑区的联动效应,相对弱化海马区CREB相关蛋白的表达。