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目的:人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV),特别是高危型HPV(HR-HPV)16持续感染是宫颈癌及其癌前病变最主要的病因因素,HPV DNA与宿主细胞DNA整合是病毒致癌作用的重要机制。HPV16早期基因E2和E6是与病毒致癌密切相关的基因,E2是HPV整合的关键基因,E6是病毒癌基因。核不均一核糖核蛋白E1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein,hnRNP E1)在基因转录和转录后调控中具有独特作用,特别值得关注的是,hnRNP E1特有的KH域提供了与HPV16基因发生特异性结合的独特分子结构,但hnRNP E1在宫颈病变中的作用及与HPV16E2和E6的关系尚不清楚。本次研究以不同宫颈病变患者为研究对象,明确其HPV感染状态,检测不同级别宫颈组织中hnRNP E1蛋白表达水平,以及与HPV16整合相关基因E2蛋白表达水平和致癌基因E6蛋白表达水平。以期揭示hnRNP E1与HPV16早期基因E2和E6在宫颈癌变进展中的作用及相互关系,为进行HPV致宫颈癌作用机制的研究提供新思路。方法:从课题组于2014年6月至9月在山西省介休市建立的自然人群宫颈病变队列中,分别选取正常宫颈妇女(NC)56例,低度宫颈上皮内瘤变(CINⅠ)患者58例和高度宫颈上皮内瘤变(CINⅡ/Ⅲ)患者50例,以及2015年11月至2016年5月在山西省肿瘤医院就诊的宫颈鳞状细胞癌(SCC)病人40例作为研究对象,所有的研究对象都是经液基薄层细胞检测技术(TCT)筛查、阴道镜检查、最终由病理学确诊的。在获得知情同意的情况下,采用结构式问卷收集全部研究对象的人口学特征、生活习惯、个人卫生习惯和生殖情况等资料,同时采集全部研究对象宫颈组织活检标本和宫颈脱落细胞。采用导流杂交法检测HPV感染状况,Western blot检测hnRNP E1以及HPV16早期基因E2和E6蛋白表达水平。应用SPSS16.0软件进行相关资料的Kruskal-Wallis H检验、Bonferroni检验、χ2检验、χ2趋势检验、Spearman秩相关分析、logistic回归和因子分析,应用相加模型、相乘模型及广义多因子降维(GMDR)模型进行交互作用评价。结果:1.HPVs/HPV16感染与宫颈病变的关系:HPVs感染率(41.38%、58.00%、87.5%)和HPV16感染率(15.52%、40.00%、67.50%)在CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和SCC组均高于NC组的感染率(16.07%、8.93%),并随着宫颈病变严重程度加重均呈现升高趋势。HPVs感染(CINⅠ:a OR=3.62(1.41-9.29);CINⅡ/Ⅲ:a OR=6.44(2.48-16.72);SCC:a OR=28.32(5.24-98.46))和HPV16感染(CINⅠ:a OR=1.73(0.51-5.86);CINⅡ/Ⅲ:a OR=5.96(1.92-18.49);SCC:a OR=13.96(3.33-58.50))与宫颈病变之间均呈正关联。2.hnRNP E1与宫颈病变的关系:hnRNP E1表达量在不同宫颈病变组间差异有统计学意义(H=9.979,P=0.019),随着宫颈病变严重程度加重呈现降低趋势(χ2趋势=9.50,P=0.002),hnRNP E1表达量与CINⅡ/Ⅲ和SCC之间均呈负关联。hnRNP E1低表达与HPV16感染在宫颈病变中存在正相加交互作用,而相乘交互作用未显示有统计学意义。3.HPV16早期基因E2和E6与宫颈病变的关系:HPV16 E2表达水平(H=16.20,P=0.001)与HPV16 E6表达水平(H=15.44,P=0.001)在不同宫颈病变组间差异均有统计学意义。HPV16 E2蛋白表达量在SCC组和CINⅡ/Ⅲ组均低于NC组,SCC组低于CINⅠ组,差异均有统计学意义,其它组间差异均无统计学意义。HPV16 E6蛋白表达量仅在SCC组与CINⅠ组差异有统计学意义,其余任意两组之间差异均无统计学意义。E2/E6比值与宫颈病变程度呈现负相关。4.hnRNP E1与HPV16早期基因E2和E6在宫颈病变中的交互作用:应用广义多因子降维模型(GMDR)分析显示,hnRNP E1低表达/HPV16 E2低表达/HPV16E6高表达在CINⅡ/Ⅲ和SCC组存在交互作用,而在CINⅠ组未发现类似交互作用存在(P>0.05)。结论:1.HPVs/HPV16感染是宫颈病变发生的危险因素,预防和控制HPVs/HPV16感染可降低宫颈病变发生的风险。2.hnRNP E1低表达可增加CINⅡ/Ⅲ和SCC的发生风险,提示hnRNP E1表达可以反映宫颈病变进展情况,hnRNP E1低表达可能是宫颈病变加重的有效指标,可以作为高度宫颈病变和癌变的诊断和预测依据,且hnRNP E1低表达与HPV16感染在宫颈病变的发生中可能存在协同作用。3.HPV16整合关键基因E2蛋白低表达与主要致癌基因E6蛋白高表达是SCC发生的危险因素,是宫颈癌变的有效指标,可以作为SCC的诊断依据。E2/E6比值与宫颈病变程度呈负相关,可以反映宫颈病变的进展情况。4.hnRNP E1低表达/HPV16 E2低表达/HPV16 E6高表达在宫颈病变中存在交互作用,三者共同存在时的作用大于单独存在时作用的和,提示宫颈病变的发生可能存在病毒与基因之间的协同作用。hnRNP E1可以作为防治宫颈病变的干预靶点,预防和控制HPV16感染,降低两者形成交互效应的机会,可使宫颈病变发生的风险降低。