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目的:观察电针对Wistar大鼠早期胶原性关节炎(Collagen-induced arthritis, CIA)足趾肿胀度、滑膜组织病理改变、滑膜组织血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide, VIP)、血管活性肠肽受体(VPAC1、VPAC2)表达的影响,探讨滑膜组织VIP及其受体与电针干预早期CIA大鼠的效应关系。
方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=10)、电针组(n=10)和电针生理盐水组(n=10),通过多点皮内注射牛Ⅱ胶原与不完全弗氏佐剂混合乳剂建立CIA模型。电针组和电针生理盐水组隔天电针大鼠双侧“足三里”(ST36)、“悬钟”(GB39)穴干预,刺激参数:连续波,频率2Hz,每次15min,每周3次,共12次。干预期间,对照组和模型组大鼠按照电针组干预时间及方法抓取处理但不针刺。实验期间每3天测量1次CIA大鼠的体重、足跖体积及关节炎指数。实验第35天,麻醉大鼠,取大鼠踝关节滑膜组织:1.观察和评价苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色的各组间滑膜组织病理改变;2.通过免疫组化(immuno-histochemistry, IHC)法,观察不同组间VIP在滑膜组织中的表达。3.通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real time fluorescence quantitative-polymerase chain reaction, FQ-PCR)法,计数并比较各组间滑膜组织VIP及其受体VPAC1、VPAC2的表达情况。
结果:实验第9天(首次电针治疗后1天)开始,对照组大鼠体重最重,模型组次之,电针组体重最轻,电针组与模型组、对照组大鼠的体重比较统计学有显著性差异(P=0.005, P=0.018)。实验第12天(加强免疫后第5天)开始,模型组和电针组大鼠分别与对照组比较足趾明显肿胀,统计学有显著性差异(P<0.001, P<0.001),表明造模成功,实验结束时电针组大鼠足趾体积较模型组明显减小,且与关节炎指数评分结果一致,统计学均有显著性差异(P<0.001);滑膜组织HE染色显示:与模型组比较电针可明显下调CIA大鼠滑膜组织中炎细胞浸润、滑膜细胞增生等情况;滑膜组织VIP免疫组化显示:电针可显著上调滑膜组织中VIP的表达;FQ-PCR显示:电针能够上调CIA滑膜组织中VIP及VPAC1、VPAC2mRNA的表达,且VPAC1的表达量明显高于VPAC2,统计学均有显著性差异(P<0.01)。
结论:
1.本实验所建立的大鼠CIA模型,与人类类风湿关节炎典型的关节表现及滑膜病理改变相似。
2.电针“足三里”、“悬钟”干预大鼠CIA具有抗炎消肿的作用。
3.电针能够上调滑膜组织VIP及其受体VPAC1、VPAC2mRNA的表达,其中对VPAC1的上调作用较VPAC2更为显著。