电针对胶原性关节炎大鼠滑膜组织血管活性肠肽及其受体表达的实验研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:goodywq2008
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目的:观察电针对Wistar大鼠早期胶原性关节炎(Collagen-induced arthritis, CIA)足趾肿胀度、滑膜组织病理改变、滑膜组织血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide, VIP)、血管活性肠肽受体(VPAC1、VPAC2)表达的影响,探讨滑膜组织VIP及其受体与电针干预早期CIA大鼠的效应关系。   方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=10)、电针组(n=10)和电针生理盐水组(n=10),通过多点皮内注射牛Ⅱ胶原与不完全弗氏佐剂混合乳剂建立CIA模型。电针组和电针生理盐水组隔天电针大鼠双侧“足三里”(ST36)、“悬钟”(GB39)穴干预,刺激参数:连续波,频率2Hz,每次15min,每周3次,共12次。干预期间,对照组和模型组大鼠按照电针组干预时间及方法抓取处理但不针刺。实验期间每3天测量1次CIA大鼠的体重、足跖体积及关节炎指数。实验第35天,麻醉大鼠,取大鼠踝关节滑膜组织:1.观察和评价苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色的各组间滑膜组织病理改变;2.通过免疫组化(immuno-histochemistry, IHC)法,观察不同组间VIP在滑膜组织中的表达。3.通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real time fluorescence quantitative-polymerase chain reaction, FQ-PCR)法,计数并比较各组间滑膜组织VIP及其受体VPAC1、VPAC2的表达情况。   结果:实验第9天(首次电针治疗后1天)开始,对照组大鼠体重最重,模型组次之,电针组体重最轻,电针组与模型组、对照组大鼠的体重比较统计学有显著性差异(P=0.005, P=0.018)。实验第12天(加强免疫后第5天)开始,模型组和电针组大鼠分别与对照组比较足趾明显肿胀,统计学有显著性差异(P<0.001, P<0.001),表明造模成功,实验结束时电针组大鼠足趾体积较模型组明显减小,且与关节炎指数评分结果一致,统计学均有显著性差异(P<0.001);滑膜组织HE染色显示:与模型组比较电针可明显下调CIA大鼠滑膜组织中炎细胞浸润、滑膜细胞增生等情况;滑膜组织VIP免疫组化显示:电针可显著上调滑膜组织中VIP的表达;FQ-PCR显示:电针能够上调CIA滑膜组织中VIP及VPAC1、VPAC2mRNA的表达,且VPAC1的表达量明显高于VPAC2,统计学均有显著性差异(P<0.01)。   结论:   1.本实验所建立的大鼠CIA模型,与人类类风湿关节炎典型的关节表现及滑膜病理改变相似。   2.电针“足三里”、“悬钟”干预大鼠CIA具有抗炎消肿的作用。   3.电针能够上调滑膜组织VIP及其受体VPAC1、VPAC2mRNA的表达,其中对VPAC1的上调作用较VPAC2更为显著。
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