产甘油假丝酵母中胞浆3-磷酸甘油脱氢酶的表达特征及其载体-宿主系统的初步探索

来源 :无锡轻工业大学 江南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanxu0214
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利用发酵法生产甘油已经成功地实现了工业化,高产甘油的优良菌株-产甘油假丝酵母(Candida glycerolgenesis Zhuge)所具有的一个明显的生理化特征是较强的耐高渗特性.该文从甘油合成途径的第一个酶-胞浆3-磷酶甘油脱氢酶着手,考察其表达特征,试图阐释胞浆3-磷酸甘油脱氢酶在甘油合成中的作用,从而为揭示耐高渗酵母C.glycerolgenesis高产甘油的机理奠定基础.放线菌酮对胞浆3-磷酸甘油脱氢酶的表达有强烈的抑制作用,发酵实验表明此时甘油的合成也受到了相当的损失,这进一步说明了胞浆3-磷酸甘油脱氢酶和甘油合成之间的密切联系.初步建立了酿酒酵母的转化系统,并将含有酿酒酵母GPD1在因和C.glycerolgenesis的GPD基因的质粒在酿酒酵母中进行表达,前者表达正常,后者则不然.筛选得到了27株C.glycerolgenesis的Ura突变株,稳定性优良的有5株,它们的生长明显落后于亲株,甘油合成的峰值也明显滞后,但产甘油能力与亲株相着不远.在此基础上对C.glycerolgenesis的载体-宿主系统的构建进行了初步探索.
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