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紫金牛科植物因含丰富的抗炎成分而受到国内外学者的广泛关注和研究,国内外学者对紫金牛科植物的根、茎、叶的化学成分进行了分析研究,分离得到香豆素类、黄酮类、皂苷类和生物碱类等多种类型的化合物,其中香豆素类和黄酮类化合物大多具有良好的药理活性。为进一步开发利用紫金牛科植物的药用资源,阐明矮地茶的药效物质基础,本文对紫金牛科植物矮地茶的化学成分和质量控制进行了研究。目的:本研究以不同产地的10个批次矮地茶为研究对象,采用UPLC-Q-TOF-MS对矮地茶样品进行化学成分研究,研究其基础化学成分;运用高效液相色谱法,获得10个不同批次矮地茶的指纹图谱信息,建立矮地茶HPLC指纹图谱质量评价方法,运用SPSS21.0分析软件对矮地茶共有峰进行聚类分析和主成分分析;建立同时测定矮地茶中5个化学成分的HPLC含量测定方法,利用该方法对10个批次不同产地的矮地茶中的没食子酸、岩白菜素、表儿茶素、槲皮苷、杨梅苷等同时进行含量测定。方法:(1)矮地茶化学成分的研究:采用75%甲醇超声提取矮地茶样品粉末。并采用UPLC-Q-TOF-MS对矮地茶样品进行化学成分研究,在电喷雾离子源负电子模式下,采用Waters CORTECS UPLC T3色谱柱(2.1mm×100mm,1.6μm),以0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相,流速为0.3 m L/min,柱温:30℃,进样量:1μL。利用一级全扫描质谱得到其化学成分的精确相对分子质量和元素信息,再根据二级全扫描质谱获得碎片离子信息,最终对矮地茶的化学成分进行结构鉴定,以期研究其药效物质基础。(2)矮地茶HPLC指纹图谱的研究:运用高效液相色谱法,色谱柱为Ultimate XB-C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速0.6m L/min,检测波长为230nm,进样量5μL,柱温30℃。将得到的10个批次不同产地的矮地茶的HPLC图,导入《中药指纹图谱相似度评价系统》(2012年版本),建立了10个批次矮地茶的指纹图谱,并进行相似度评价。将各共有峰峰面积导入SSPS21.0统计软件,对其进行聚类分析和主成分分析。(3)矮地茶中5个成分含量测定方法的建立:运用高效液相色谱法,色谱柱为Ultimate XB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱);流速1m L/min;检测波长为270nm,进样量5μL,柱温30℃。结果:(1)采用UPLC-Q-TOF-MS对矮地茶进行基础化学成分研究,鉴定出了16个化学成分,其中有2个香豆素类化合物、6个黄酮类化合物、1个三萜皂苷类成分,1个甾醇类成分、4个苯醌类成分、2个茶多酚类成分,并推测出其可能的裂解途径。(2)研究建立了10个批次不同产地的矮地茶的HPLC指纹图谱。以8号峰(岩白菜素)为参照峰,确认了14个共有峰,其中的5个峰得到了指认,分别为没食子酸、岩白菜素、表儿茶素、杨梅苷和槲皮苷;并用相似度软件分析,发现10个批次不同产地的矮地茶的相似度在0.903~0.992之间,说明不同产地的矮地茶样品化学成分相似,质量差异不大;通过聚类分析可以把10个批次的矮地茶分为2大类,S3、S6、S7、S9、S10为第一类,S1、S2、S4、S5、S8为第二类;主成分分析结果表明有3个主成分,其累计方差的贡献率为98.62%。(3)建立了同时测定矮地茶中5种活性成分的HPLC含量测定方法,没食子酸、岩白菜素、表儿茶素、杨梅苷、槲皮苷的质量浓度线性范围分别为:0.01584~0.1584、0.3010~3.0100、0.1674~1.6740、0.0360~0.3600、0.0800~0.8000μg,相关系数均大于0.99992;精密度(n=6)、重复性(n=6)、稳定性(24 h,n=6)试验的RSD均小于3%;各成分平均加样回收率分别为:98.66%、100.24%、101.87%、101.38%、100.35%(RSD值在0.63%~2.49%之间);10个批次不同产地的矮地茶中,上述5个成分的含量分别为:0.205~0.613、2.847~5.590、0.647~1.520、0.256~1.005、0.508~3.360mg。结论:本研究通过高效液相色谱-质谱联用的技术鉴定出矮地茶样品中的16个成分,能够阐明矮地茶的部分化学成分,为其药理作用研究和药效研究提供物质基础依据;运用高效液相色谱法,建立了矮地茶指纹图谱共有模式特征性较强,可用于矮地茶的定性研究,建立的指纹图谱质量评价方法快速简便、稳定可靠,能够有效的应用于矮地茶药材真伪的鉴别;本研究建立了矮地茶的5种化学成分同时含量测定的方法,该方法操作简便、重复性好,可用于矮地茶中5种成分的含量测定。本研究能够为矮地茶的质量控制与评价提供有效的方法和科学的依据。