【摘 要】
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该课题基于包虫病免疫预防研究的现状,从基因水平开展包虫病免疫预防基础性研究.该研究分为三个部分.一、采用SMART技术构建了E.granulosus cDNA文库,对文库进行了鉴定,随机
【出 处】
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中山医科大学 中山大学中山医学院 中山大学
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该课题基于包虫病免疫预防研究的现状,从基因水平开展包虫病免疫预防基础性研究.该研究分为三个部分.一、采用SMART技术构建了E.granulosus cDNA文库,对文库进行了鉴定,随机筛选文库克隆,对其进行序列测定和同源性比较,并在GenBank登录了11个基因,丰富了E.granulosus基因资料.二、选定与E.granulosus免疫、代谢极为密切的特定目的基因:脂肪酸结合蛋白(Fatty acid binding protein,FABP)、EG95、钙结合蛋白(Calcium-binding protein CABP)、Antigen B、伸长因子(EF-1)基因:根据这些已发表基因的序列资料,设计引物,以文库作为模板进行PCR扩展,将PCR产物克隆到pMD18-T载体,进行序列测定,并进行同源性比较和序列分析;同时以E.granulosus原头蚴基因组DNA作为模板,扩增EG95和FABP基因,比较从不同模板来源的EG95和FABP基因序列的差异,分析它们的结构和功能.三、该研究根据包虫病诊断研究现状,结合国外资料采用简便的一步层析法从包囊液中纯化脂蛋白抗原,应用纯化的抗原采ELISHA、Dipstick方法对包虫病的血清进行诊断研究,其敏感性和特异性分别为:ELISA:97﹪和94﹪;Dipstick:80﹪和100﹪.该研究为包虫病快速诊断试剂盒的研制奠定基础.
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