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该文利用将珠磨法破碎细胞和双水相萃取结合起来的萃取破碎新工艺,成功实现了对三种酵母胞内酶乙醇脱氢酶(ADH)、乳酸脱氢酶(LDH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)的提取,建立了新破碎动力学模型,并对反相萃取条件进行了摸索.首先考察了珠磨法破碎细胞的影响因素,得出了破碎细胞的适宜条件.研究了加入双水相分对破碎过程的影响,证明了萃取破碎法的可行性;选定了PEG/(NH<,4>)<,2>SO<,4>系统为合适的双水相体系.利用PEG600/(NH<,4>)<,2>SO<,4>系统萃取破碎酵母细胞提取ADH和G6PDH.萃取结果为:对ADH,K<,A>=13.2,Y<,t,A>=93.9%;对G6PDH,K<,G>=13.4,Y<,t,G>=95.1%.采用混合PEG/(NH<,4>)<,2>SO<,4>系统用萃取破碎法成功提取了LDH和ADH.结果为:对ADH来说,K<,A>=41.4,Y<,t,A>=99.8%,Q<,t>=96.1%;对LDH来说:K<,L>=3.7,Y<,t,L>=96.6%,Q<,t>=95.0%.进行了清除细胞碎片的研究得出了最佳条件,使细胞碎片清除率都在90%以上.将萃取破碎法和先破碎萃取法进行了比较,前者上相中酶活性和比活都比后者高,说明了前者具有一定的优越性.对反相萃取条件进行了初步模索回收目标酶.通过选择合适的反萃取条件使ADH的分配系数K<,A>小于0.4,下相活性收率Y<,b,A>大于75%;G6PDH珠分配系数K<,G>小于0.1相活性收率Y<,b,G>大于90%.