【摘 要】
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目的:探究Nrf1在宫颈癌组织及对应癌旁组织中的表达差异,进而研究其对宫颈癌HeLa及SiHa细胞的迁移、克隆形成及细胞活力的影响。方法:1、对TCGA数据分析比较Nrf1在宫颈癌及正常宫颈组织中的表达差异;2、在Linked Omics、Onco Lnc网站检索,探究Nrf1表达水平与宫颈癌患者预后的关系;3、选取11例2019年江苏大学附属昆山医院生物样本库中的宫颈癌手术病人的癌组织及癌旁组织
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目的:探究Nrf1在宫颈癌组织及对应癌旁组织中的表达差异,进而研究其对宫颈癌HeLa及SiHa细胞的迁移、克隆形成及细胞活力的影响。方法:1、对TCGA数据分析比较Nrf1在宫颈癌及正常宫颈组织中的表达差异;2、在Linked Omics、Onco Lnc网站检索,探究Nrf1表达水平与宫颈癌患者预后的关系;3、选取11例2019年江苏大学附属昆山医院生物样本库中的宫颈癌手术病人的癌组织及癌旁组织标本,通过q RT-PCR检测其中Nrf1的表达量,探究Nrf1在宫颈癌组织中是否存在组织特异性;4、通过慢病毒转染方式将Nrf1序列转入宫颈癌HeLa及SiHa细胞内造成Nrf1高表达宫颈癌细胞株;5、通过q RT-PCR及Western Blot方法检测HeLa及SiHa细胞株内Nrf1的m RNA水平和蛋白水平的转染效率;6、通过细胞划痕实验、Transwell细胞迁移实验验证Nrf1过表达对宫颈癌HeLa及SiHa细胞迁移能力的影响;7、通过细胞克隆形成实验验证Nrf1过表达对宫颈癌HeLa及SiHa细胞克隆形成的影响;8、通过CCK8实验验证Nrf1过表达对HeLa和SiHa细胞株细胞活力的影响。结果:1、对TCGA数据的分析显示Nrf1在正常宫颈组织中高表达,在宫颈癌组织中低表达;2、在Linked Omics、Onco Lnc网站进行检索,发现Nrf1的表达水平与宫颈癌患者预后呈正相关;3、在11对宫颈癌及癌旁组织中,Nrf1均表现为在宫颈癌组织中的低表达及癌旁组织中的高表达,表明Nrf1在宫颈癌组织中具有表达特异性;4、通过荧光显像能看到Nrf1过表达慢病毒在转入HeLa及SiHa细胞内72小时开始表达,q RT-PCR证实了Nrf1在m RNA水平的转染效率,Western Blot证实了Nrf1在蛋白水平的转染效率;5、在细胞划痕实验中Nrf1能够抑制宫颈癌HeLa及SiHa细胞的迁移,通过Transwell实验再次证明了这一点;6、在克隆形成实验中,Nrf1具有抑制宫颈癌HeLa及SiHa细胞的克隆形成能力;7、Nrf1过表达并没有对HeLa和SiHa细胞株细胞活力产生明显影响。结论:Nrf1在宫颈癌中呈现低表达,有利于患者预后,并能够抑制宫颈癌HeLa及SiHa细胞的迁移及克隆形成能力,对它们的细胞活力没有产生明显影响。Nrf1具有抑制宫颈癌生长的能力。
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