“温阳补气”针法对EAMG大鼠RNS衰减值及血清AchR表达水平影响的研究

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:waterxiang
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目的:通过AchR片段129~145建立重症肌无力经典动物模型—实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental autoimmune myasthenia gravis-EAMG)大鼠,通过“温阳补气”针法对EAMG大鼠低频重复神经电刺激(repetitive nerve stimulation,RNS)及血清乙酰胆碱受体(Acetylcholine receptors AchR)影响的研究,探讨“温阳补气”针法对EAMG大鼠治疗作用及作用机制。进一步丰富了中医治痿理论,为自身免疫性疾病的治疗及机制的探讨提供了新的手段。方法:实验选取Lewis大鼠,将AchR片段129~145以1:2的比例与完全弗氏佐剂(CFA)完全乳化,建立EAMG大鼠模型。上述抗原乳剂以200μl/只注射于大鼠四足垫部(50μl),抗原量为50μg/只。分别于初次免疫后第4周、第8周,再次同法免疫接种。记录大鼠的体重变化,参考Lennon的评分标准评价模型症状等级,RNS衰减值和血清AchR-ab表达水平判定模型是否成功。选取造模成功大鼠30只,随机分为模型组、溴吡斯的明组、“温阳补气”针法组。空白组同期同条件饲养,相同条件下抓捕与处理;模型组大鼠也是同期同条件饲养,不予任何治疗;“温阳补气”针法组给予“温阳补气”针法组治疗;溴吡斯的明组给予溴吡斯的明治疗。分别于发病后的第1天及干预后第14天应用Oxford-肌电图诱发电位仪检测RNS衰减值变化;应用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测AchR表达水平变化,并每周观察EAMG大鼠症状和体重变化。结果:1.应用70只大鼠建立模型,成功32只(成功后死亡2只),成功率为45.71%。2.EAMG大鼠体重增加缓慢,表现出较为明显的肌无力症状,临床症状评分为2.150,与空白组比较有明显性差异(p<0.05)。RNS衰减值检测19.853与空白组0.064比较有明显升高;血清AchR表达水平4.044与空白组30.746比较明显降低,具有明显统计学意义。3.应用“温阳补气”针法和溴吡斯的明治疗后,“温阳补气”针法组及溴吡斯的明组同模型组大鼠比较,大鼠Lennon症状评分降低,体重明显增加,RNS衰减值显著降低,血清AchR表达水平明显升高。4.在体重增加方面,“温阳补气”针法组结果明显高于溴吡斯的明治疗组(p<0.05);RNS衰减值和血清AchR表达水平两组之间无明显差异。结论:1.本实验应用AchR片段129~145加上完全弗氏佐剂(CFA)免疫大鼠,结果实验大鼠与人类MG的临床症状改变相似,Lennon的评分标准评价症状等级、RNS衰减值和血清AchR-ab表达水平初步判定EAMG模型建立成功。2.“温阳补气”针法治疗EAMG有明显疗效。能够使EAMG大鼠体重明显增加;Lennon症状评分明显降低,肌力明显增加;RNS衰减值显著降低;血清AchR表达水平明显升高。3.治疗第14天后,“温阳补气”针法组与溴吡斯的明组疗效相当,无明显差异(p>0.05)。但从EAMG大鼠体重变化上比较,“温阳补气”针法组大鼠体重优于溴吡斯的明组。
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