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通过筛选实验室保存的黑曲霉(Aspergillus niger 3.4309)突变株,得到两株产耐热糖化酶的菌株9-1-D及18-3-H,其所产糖化酶G9-1-D及G18-3-H的最适作用温度均为60℃,比出发株糖化酶的最适温度提高10℃,表明两株突变株能分泌耐热糖化酶；在各自的最适温度下,出发株糖化酶的比活力为131.23 U/mg,耐热糖化酶G9-1-D的比活力为171.10 U/mg,耐热糖化酶G18-3-H的酶活为142.83 U/mg,分别比出发株糖化酶高30%和9%。耐热糖化酶G9-1-D及G18-3-H60℃条件下糖化液DE值达到70%时,所需反应时间为10h,与出发株糖化酶相比,缩短反应时间10h；70℃条件下糖化液DE值达到70%时,所需反应时间为5 h,与出发株相比,缩短反应时间15 h。耐热糖化酶G9-1-D及G18-3-H的最适糖化温度为70℃。耐热糖化酶G9-1-D的最适复合添加剂为：50 mmo·L-1 Na+、0.05 mol·L-1甘油、3g·L-1黄原胶、2 g·L-1海藻酸钠,在最适复合添加剂存在时,糖化过程中DE值升高的速度加快,70℃条件下糖化液的DE值达到85.50%,比对照提高7.86。耐热糖化酶G18-3-H的最适复合添加剂为：50mmol·L-1 Na+、0.05 mol·L-1甘油、2g·L-1黄原胶、3 g·L-1海藻酸钠,在最适复合添加剂存在时,70℃条件下糖化液的DE值达到81.40%,比对照提高5.77。出发株糖化酶的最适复合添加剂为：50 mmol·L-1 Na+、0.03 mol·L-1甘油、3g·L-1黄原胶、3 g·L-1海藻酸钠。在最适复合添加剂存在时,70℃条件下糖化液的DE值达到76.38%,比对照提高7.81。结果表明,复合添加剂的存在能够在糖化过程中保护酶的三维构象。耐热糖化酶G9-1-D及G18-3-H分别含有三个同工酶组分1′、2′、3′,均为糖蛋白,组分G9-1-D-3’和G18.3-H-3’具有耐热性,其最适糖化温度为70℃,最适糖化pH为pH4.5,分子量均约为50.0kD。