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目的: 观察血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B (PKB或Akt)在胃癌组织中的表达情况,探讨VEGFR-3在胃癌发生发展和淋巴结转移过程中的意义及与PI3K/Akt的关系。
方法: 采用RT-PCR法检测36例胃癌及癌旁组织中VEGFR-3 mRNA、PI3K mRNA、Akt mRNA 的表达,应用Image J图像分析系统对结果进行图像分析,计算条带与GAPDH的灰度比值。采用免疫组织化学法检测VEGFR-3、P-Akt蛋白的表达,并用图像分析方法测定其累积光密度值。采用Western Blot法检测VEGFR-3、P-Akt蛋白的表达,应用Image J图像分析系统对结果进行图像分析,计算条带与β-actin的灰度比值。
结果: RT-PCR结果显示胃癌组织中VEGFR-3 mRNA、PI3K mRNA、Akt mRNA的表达量分别为1.03±0.03、1.15±0.12、1.13±0.07,癌旁组织的表达量分别为0.63±0.16、0.59±0.25、0.63±0.08,三种基因在胃癌组织与癌旁组织中的表达均有显著性差异(P <0.05),且VEGFR-3 mRNA与PI3K mRNA、Akt mRNA表达呈正相关 (r =0.58,P <0.05 ;r =0.52,P <0.05)。VEGFR-3 mRNA在胃癌组织中的表达与TNM分期、浸润深度、淋巴结转移和远处转移有关(P <0.05)。免疫组织化学结果显示VEGFR-3、P-Akt蛋白在胃癌组织中的表达量分别为2.34±4.96(×10-2)、10.79±0.94(×10-2),癌旁组织中的表达量分别为0.40±0.08(×10-2)、5.23±3.08(×10-2),两种蛋白在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P <0.05),并且VEGFR-3、 P-Akt蛋白表达水平呈正相关 (r =0.59,P <0.05)。Western Blot 结果显示VEGFR-3、P-Akt蛋白在胃癌组织中的表达量分别为0.72±0.07、0.71±0.15,在癌旁组织中的表达量分别为0.48±0.11、0.37±0.05,两种蛋白在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织 (P <0.05),两者在胃癌组织中的表达与TNM分期、浸润深度、组织分化程度、淋巴结转移和远处转移有关 (P <0.05) ,且VEGFR-3、P-Akt蛋白表达呈正相关 (r =0.41,P <0.05)。
结论: VEGFR-3可能参与了胃癌发生发展和淋巴结转移过程。VEGFR-3阳性表达的胃癌患者可能更易发生淋巴结转移,VEGFR-3可作为评估患者预后的重要指标。VEGFR-3与PI3K/Akt的表达具有一定的相关性,可能通过激活PI3K/Akt通路参与了胃癌的淋巴结转移机制。