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目的：本研究以人子宫颈癌Hela细胞为研究对象，利用维生素K3制作氧化应激模型，并利用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-Methyladenine,3-MA）和氯喹（chloroquine，CQ）分别抑制自噬的起始和终末阶段，从线粒体动态平衡的角度探讨氧化应激在Hela细胞中发挥其毒性作用的具体机制。。方法：实验分为6组：对照组、VK3组、3-MA组、VK3+3-MA组、CQ组、VK3+CQ组。（1）Western Blot检测自噬相关蛋白Beclin1的表达;激光共聚焦显微镜观察LC3的聚集; AO染色检测溶酶体膜完整性。（2）MTT法检测各组Hela细胞生存率;Hoechst33342染色观察细胞核形态；MTT法检测Caspase特异性抑制剂z-VAD-fmk对各组细胞增殖率的影响。（3）RT-PCR检测线粒体分裂融合基因mRNA表达的变化；Rodamine123染色检测线粒体膜电势。结果：（1）VK3作用12h后Beclin1蛋白表达较对照组增强，而3-MA和VK3+3-MA组的Beclin1水平较对照组显著下降。CQ组与对照组相比，Beclin1表达显著增强，VK3+CQ组则进一步增强。（2）激光共聚焦显微镜拍摄结果显示，与对照组相比，VK3单独应用组LC3表达增强，而3-MA组及VK3+3-MA组的LC3表达均下降。CQ单独应用组与对照组相比LC3表达明显增强，VK3+CQ组的LC3表达量则进一步加强。（3）与对照组相比，VK3单独作用组溶酶体稳定性下降，VK3+3-MA组溶酶体稳定性进一步显著下降，而3-MA单独应用组与对照组相比无明显差异。不同的是，CQ单独应用组与对照组相比溶酶体稳定性有一定的下降，而VK3+CQ组则进一步下降。（4）VK3各给药组（7.5uM,15uM,30uM,60uM）作用6h，12h后，对人宫颈癌Hela细胞的增殖均有抑制作用，并呈时间、剂量依赖性；与单独应用VK3相比，VK3和3-MA,CQ联合应用导致细胞存活率进一步降低，而单独应用3-MA和CQ对细胞的生存率没有影响。（5）VK3作用于Hela细胞12h后，Hoechst33342染色可观察到细胞核固缩浓染，而VK3与3-MA，CQ联合应用后，核固缩浓染现象更加明显。（6）caspase特异性抑制剂Z-VAD-fmk部分地减少抑制自噬对Hela细胞存活率的抑制作用。（7）与对照组相比，在VK3单独作用于Hela细胞12h之后，线粒体融合基因Mfn1,Mfn2和Opa1mRNA表达明显下降，而VK3+CQ组和VK3+3-MA组与VK3单独作用组相比，这三个融合基因的表达都进一步下降。（8）与对照组相比，VK3单独作用组线粒体分裂基因Drp1和Fis1的mRNA表达都明显增强，而MTP18的表达却有所下降。VK3与CQ联合作用组与VK3单独作用组相比，Fis1的表达显著下降，而Drp1和MTP18无明显变化。而VK3和3-MA联合作用组与VK3单独作用相比，Drp1和Fis1的表达都显著增强，而MTP18无明显变化。（8）与对照组相比，3-MA组线粒体膜电势没有明显变化，而CQ组的线粒体膜电势略有下降。VK3单独作用组与对照组相比，细胞膜电势下降，VK3与3-MA，CQ联合应用与VK3单独作用组相比，细胞膜电势没有明显变化。结论:（1）VK3诱导的Hela细胞死亡既与caspase依赖性细胞死亡有关，同时也与caspase非依赖性细胞死亡途径有关。（2）在VK3诱导Hela细胞死亡的过程中，细胞自噬水平提高。3-MA和CQ抑制自噬增加了VK3所致的Hela细胞死亡率，表明自噬在VK3诱导细胞的死亡中发挥保护作用。（3）在VK3诱导Hela细胞损伤过程中，线粒体膜电势下降，线粒体融合蛋白表达下降，分裂蛋白表达增强，提示线粒体融合功能下降和/或过分分裂导致线粒体膜完整性下降，可能引起ROS释放增多，形成恶性循环，是造成细胞损伤机制之一。（4）自噬抑制剂3-MA和CQ影响VK3诱导线粒体分裂-融合失平衡的作用不同，可能与3-MA和CQ作用于自噬不同阶段而导致线粒体暴露于不同的环境有关。