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目的:本文提取蛇床子挥发油,以其为模型药制备水包油型微乳。对微乳进行处方的单因素考察及优化,对制剂进行质量评价、皮肤安全性考察和慢性皮炎湿疹的药效学初步研究。探索蛇床子挥发油外用新剂型及对慢性皮炎湿疹的治疗效果,提高用药安全,为蛇床子挥发油在临床上治疗湿疹的可能性提供理论与实验依据。 方法:提取工艺的研究:以挥发油提取率为评价指标,通过单因素考察及L9(34)正交试验,对蛇床子挥发油水蒸气蒸馏法的浸泡时间、提取时间、加水量进行考察,确定挥发油的提取工艺;通过GC-MS及HPLC检测蛇床子挥发油中主要成分及指标性成分的含量。 微乳处方的研究及优化:以伪三元相图面积为评价指标,从常用表面活性剂及助表面活性剂中筛选合适的辅料并确定Km值,以外观及稳定性为指标确定制备方法;以粒径、PDI及透光率为指标通过单因素实验考察微乳的构成比例对稳定性的影响;再以星点设计-效应面法对微乳处方进行优化。 制剂的性质考察:测定蛇床子挥发油微乳的粒径、PDI、pH值、电导率、透光率、体外透皮速率及皮肤滞留量。 制剂的初步药效研究:以DNCB建立小鼠慢性皮炎湿疹模型,并记录其给药过程中的耳厚度变化和耳变应反应评分;检测给药完成后的耳肿胀度,观察病理切片结果,确定制剂的药效。并通过皮肤安全性实验,评价制剂及挥发油对家兔皮肤的刺激性。 结果:提取工艺的研究:挥发油的提取工艺为蛇床子饮片加水量为8倍、浸泡4小时,以水蒸气蒸馏法蒸馏8小时,蛇床子挥发油得率为1.50%。GC-MS测定结果示:D-柠檬烯、左旋乙酸龙脑酯、莰烯及β-蒎烯等为提取的蛇床子挥发油的主要成分,且挥发油中含有蛇床子素;HPLC测定结果示:所提蛇床子挥发油中含蛇床子素1.39%。 微乳处方的研究:伪三元相图结果示:与无水乙醇配伍时,常用表面活性剂的微乳区域由大到小依次为吐温80>聚氧乙烯蓖麻油EL>卵磷脂;与聚氧乙烯蓖麻油EL配伍时不同助表面活性剂的微乳区域由大到小依次为Transcutol(@)P>异丙醇>无水乙醇>1,2-丙二醇;不同表面活性剂和助表面活性剂的比值(Km值)的微乳区域由大到小为1.5∶1>1∶1>2∶1>3∶1>1∶2>1∶3。手工滴加法优于超声乳匀法,最大载药量为4%(w/w)。 微乳处方的优化:微乳的水相及表面活性剂的比例增加与制剂稳定性呈正相关,挥发油比例增加与制剂稳定性负相关;蛇床子挥发油微乳的最优处方为蛇床子挥发油3.0%、聚氧乙烯蓖麻油EL10.9%、Transcutol(@)P7.8%和水78.3%。 制剂的性质考察:制备的蛇床子挥发油微乳的粒径为21.70±0.18nm,PDI为0.218±0.009,pH值为4.27±0.05,电导率为176.2±0.2μs/cm,透光率97.34±0.06%;制剂和挥发油的体外透皮性良好,测得稳态渗透速率与挥发油基本一致,时滞为2小时;微乳中蛇床子素的皮肤滞留量为70.57μg/cm2;常温放置3个月,制剂稳定。 制剂的初步药效研究:制备的微乳对小鼠慢性皮炎湿疹模型具有抑制耳肿胀及炎症反应的作用,微乳高、中、低剂量组均有一定治疗作用。皮肤刺激性实验结果表明,给药72h后,微乳组皮肤安全评价为无刺激性,挥发油组为中度刺激性。 结论:以微乳包载蛇床子挥发油,有较好的透皮表现及皮肤滞留效果,能达到皮肤局部给药的目的;制备的微乳能改善蛇床子挥发油的不良气味,在一定时间内有效防止挥发油的损失,保证模型药稳定;并能有效缓解慢性接触性湿疹导致的红肿情况,降低挥发油的皮肤刺激性,达到安全、稳定、有效、方便用药的目的。