目的:探讨线粒体氯通道/细胞内氯通道4（mtCLIC/CLIC4）在H₂O₂诱导的大鼠胶质细胞损伤过程中作用及机制。方法:根据RNAi设计原理以及基因重组技术构建siRNA-CLIC4表达载体,转染SD大鼠C6胶质瘤细胞,对比观察CLIC4和CLIC4-RNAi在H₂O₂诱导的大鼠胶质细胞损伤过程中的作用。结果:（1）H₂O₂诱导的大鼠C6细胞损伤过程中,CLIC4蛋白表达显著增强,同时Caspase3、VDAC1蛋白表达明显增强以及Bax/Bcl-2比值明显增高。（2）首次完成大鼠C6胶质瘤细胞CLIC4cDNA钓取,亚克隆和测序,发现新的SD大鼠胶质细胞CLIC4序列,将结果登录到GenBank,获得登录号:Bankit878161,EF397567。（3）首次利用RNAi技术成功构建siRNA-CLIC4表达质粒,显著抑制CLIC4基因表达,并获得稳定转染C6细胞株。（4）在CLIC4干涉组（pSH1Si-CLIC4）中尽管总CLIC4蛋白表达在RNAi作用下明显下调,但伴随H₂O₂浓度的增加,细胞核内的CLIC4蛋白表达仍显著增加,促进了H₂O₂诱导的细胞凋亡。结论:发现新的SD大鼠胶质细胞CLIC4cDNA的基因序列并成功构建siRNA-CLIC4有效表达质粒及稳定转染的C6细胞株。在H₂O₂诱导的C6细胞损伤过程中,CLIC4作为凋亡效应分子参与了其线粒体途径的凋亡过程。而通过RNAi技术下调CLIC4表达后,同样明显促进了H₂O₂诱导的细胞凋亡,该过程中细胞核靶向的CLIC4大量入核,可能与CLIC4作为离子通道影响了细胞核内离子平衡并改变其pH值水平有关,进而通过pH-依赖的核酸内切酶激活的细胞核凋亡途径加速细胞凋亡。本研究为探讨细胞内氯通道在神经退行性疾病发病过程中所发挥的作用进行了新的探索,也为寻找肿瘤基因治疗新的作用靶点进行了有益的尝试。