目的：探讨初治成人原发性免疫性血小板减少症（ITP）患者外周血单个核细胞（PBMC）糖皮质激素受体（GR）亚型α、β、γ和p的表达及与糖皮质激素（GC）抵抗的关系，为逆转GC抵抗及实现ITP的个体化治疗提供线索及依据。方法：连续选取2009年2月～2011年7月大连医科大学附属一院血液科住院初治ITP患者62例（女性39例，男性23例，中位年龄37岁），健康对照者38例（女性25例，男性13例，中位年龄34岁）为研究对象。其中39例ITP患者接受了GC治疗，根据GC疗效分为GC敏感组（GCS）28例(女性20例，男性8例，中位年龄33岁）和GC抵抗组（GCR）11例(女性7例，男性4例，中位年龄44岁）。1.采集晨空腹肘静脉血5ml，采用Ficoll密度梯度离心法分离PBMC。应用实时荧光定量PCR SYBR Green染料法检测患者和正常人GRα、GRβ、GRγ和GRpmRNA的表达。比较患者组与正常组，GCS组和GCR组GR亚型表达的差异。分析患者组和正常组，GCS组和GCR组四种受体亚型总和组间表达差异。2.分析各受体亚型间及与患者病初血小板水平的相关性。3.采用Western blot方法检测ITP患者GCS组20例、GCR组8例和正常人组20例PBMC中GRα和GRβ蛋白的表达，并比较组间差异。结果:患者组和正常组GR亚型表达为非正态分布数据，用中位数（四分位数间距）表示，其中患者组表达差异大于正常对照组。1.患者组4种GR亚型总和为5.17（1.85-17.36），显著高于正常人组2.89（1.24-8.01）（P<0.05），其中GRα和GRβ mRNA的表达较正常组有显著升高（P<0.05），患者组GRα mRNA为1.20（0.42-3.27），正常组为0.96（0.31-1.46）；患者组GRβ mRNA为0.06（0.00-0.45），正常组为0.02（0.00-0.05）。GCS组和GCR组4种受体亚型总和无显著差异。GRβ、γ、p含量较低，在部分患者无法测出。患者组与正常组GRγ和GRp mRNA表达无显著差异。2. GCS组和GCR组GRα、GRβ、GRγ和GRp mRNA的表达均无显著差异（P>0.05），但GRα在GCS组为1.11(0.30-2.69)，GCR组为0.80(0.34-3.05)，在GCS组呈升高趋势；GRγ在GCS组为0.20(0.05-1.41)，GCR组为0.27（0.00-3.23），GRγ在GCR组呈升高趋势。3.患者GRp表达与GRα、GRp与GRβ、GRp与GRγ mRNA表达均呈正相关（P<0.05），其中GRp与GRα相关性及相关系数最大（r=0.58，P<0.01）。其它受体亚型之间及各受体亚型与病初血小板水平无明显相关性。4. GCS组GRα蛋白显著高于GCR组（P<0.05），GCS组、GCR组分别与正常组比较无显著差异。GRβ蛋白在3组间均未测出。结论：1. ITP患者的受体亚型数据范围较大，而正常人亚型表达相对稳定，数据范围较小，提示患者的GR亚型可能受多种因素调控，且ITP是一种异质性疾病。2.初治ITP患者存在GR表达上调，以GRα和GRβ升高为主。3. ITP患者GC抵抗与GRα蛋白的表达成负相关，可能与GRγ成正相关。4. GRβ mRNA含量极低，在蛋白水平未检测出，提示ITP患者的GC抵抗与GRβ无关。5. GRp mRNA与GRα mRNA相关性及相关系数最大，为正相关，结合GRαmRNA在敏感组呈升高趋势，GRα蛋白在敏感组显著升高，推测GRp可能介导GC效应,有待进一步扩大研究。目的：探讨原发免疫性血小板减少症（ITP）患者糖皮质激素受体分子伴侣热休克蛋白90（HSP90）、核转录因子-κB（NF-κB）和激活蛋白-1（AP-1）表达特点及与激素疗效、部分临床指标的相关性。方法：连续选取2009年2月～2011年7月大连医科大学附属一院血液科住院初治ITP患者44例，健康对照者32例为研究对象。1.抽取晨空腹肘静脉血5ml，采用Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞。采用实时荧光定量PCR方法检测患者外周血单个核细胞（PBMC）HSP90mRNA，比较组间差异。将患者按糖皮质激素(GC)治疗效应分为GC敏感组（GCS）和GC抵抗组（GCR），再按年龄、性别、病程和病情进行分亚组比较。2.40例ITP患者和29例正常人前期已进行GRα mRNA检测，其中GCS组24例、GCR组7例，分析HSP90/GRα在患者组和正常组间的差异及与GC效应的相关性。3.分析患者HSP90mRNA表达量与病初血小板数、骨髓巨核细胞数及血小板抗体IgG的相关性。4.应用Western blot方法检测20例GC敏感患者、6例GC抵抗患者和20例正常人PBMC核蛋白P65/NF-κB和C-Jun/AP-1蛋白表达，比较组间差异。结果：1.44例ITP患者HSP90mRNA中位数为0.90（0.48-2.52），32例正常人为1.40（0.82-2.65），正常人表达较患者有升高趋势，但两组无统计学差异（P>0.05）。2.成人急性ITP患者HSP90mRNA表达显著高于慢性患者（P<0.05）。GCS组表达较GCR组有升高趋势，但无统计学差异（P＞0.05）。再按性别、年龄和病情分组比较，可见女性较男性患者，年龄≤60岁较年龄＞60岁患者，轻型较重型患者，HSP90mRNA均有升高趋势，但亦无统计学差异（P＞0.05）。3.患者组较正常组GRα mRNA呈升高趋势，HSP90/GRα呈下降趋势（P=0.09）。GCS组和GCR组GRα mRNA的表达和HSP90/GRα均无显著差异（P>0.05），但HSP90/GRα在GCR组呈升高趋势。4.患者HSP90mRNA表达量与病初血小板数、骨髓巨核细胞数及血小板抗体IgG无明显相关性。5. P65/NF-κB在GCR组表达显著高于GCS组(P<0.05)，在正常人组的表达亦显著高于GCS组(P<0.05)，GCR组和正常人组的表达无显著差异。C-Jun蛋白的表达3组间无显著差异。结论：1. ITP患者HSP90mRNA表达较正常人组呈下降趋势，结合第一部分研究患者GRα mRNA表达显著高于正常组，提示HSP90mRNA可能介导GC效应。2. HSP90mRNA与ITP患者病程密切相关，急性期患者表达下降，且男性、高龄、重型、慢性患者较女性、低龄、轻型患者HSP90mRNA表达均有下降趋势，而前者均易发生GC抵抗，提示HSP90与GC疗效可能成正相关。3. NF-κB高表达与GC抵抗有关。AP-1可能不介导ITP的GC效应。背景及目的：除了体液免疫机制以外，细胞免疫机制在ITP发病中亦起重要作用，其中包括T淋巴细胞亚群和功能的改变。CD4+T淋巴细胞功能失调的研究日渐深入，CD4+T淋巴细胞可分为Th1、Th2、调节T细胞（T-reg）和Th17四类。它们通过分泌不同的细胞因子介导免疫反应。本研究通过检测ITP患者和正常人血浆上述细胞亚群所分泌细胞因子含量，探讨CD4+T淋巴细胞亚群功能失调在ITP发病中的作用。方法：连续选取2009年10月～2011年9月大连医科大学附属一院血液科住院ITP患者52例，健康对照者30例为研究对象。抽取晨空腹肘静脉血5ml，分离血浆。选择Th1细胞分泌的IL-2、IFN-γ，Th2细胞分泌的IL-4、IL-10，T-reg细胞分泌的TGF-β1，Th17细胞分泌的IL-17为研究对象。1.采用ELISA方法检测52例ITP患者和30例正常人血浆中上述细胞因子浓度，比较患者组与正常组间差异。将患者组按年龄、性别、病程、病情、既往治疗与否进行再分组，比较亚组间上述细胞因子浓度差异。2.将患者细胞因子浓度与病初血小板数、骨髓巨核细胞数和血小板抗体IgG（PAIgG）进行相关性分析。结果：1.患者组IL-4和IL-10表达显著高于正常组(P<0.05)，而IFN-γ、 IL-2、TGF-β1和IL-17显著低于正常组(P<0.05)。2.亚组分析比较发现仅IL-17在慢性ITP患者中的血浆浓度显著高于急性患者(P<0.05)。其它细胞因子在亚组间比较及IL-17在其它亚组间比较无显著差异。3.患者血浆IFN-γ浓度与PAIgG量呈正相关(r=0.48，P=0.02)。其它细胞因子与血小板数、骨髓巨核细胞数及血小板抗体IgG无明显相关性。结论：1． ITP患者Th2型功能亢进，Th1、Treg和Th17功能受抑。2． IL-17与病程密切相关。群的失调可能成为ITP新的治疗方向。