皱皮木瓜活性物质综合提取利用研究

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皱皮木瓜(Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai)是一种药食同源植物,富含多种生物活性成分。本文以皱皮木瓜鲜果为材料,同时利用皱皮木瓜水提物和榨汁后副产物,对SOD、齐墩果酸和总黄酮进行综合提取;优化SOD提取纯化工艺;以皱皮木瓜原料粉为材料,优化齐墩果酸与总黄酮的提取及分离纯化工艺;在该提取工艺下,将干渣粉与原料粉中的齐墩果酸和总黄酮含量进行比较,考察皱皮木瓜渣的利用价值。主要研究结果如下。皱皮木瓜鲜果含水量为85.47%。原料粉与干渣粉质量分别为对应鲜果重的14.53%和7.71%。皱皮木瓜鲜果SOD的提取工艺优化为:以水作为提取溶剂,料液比1:2,浸提时间为1h。SOD的分离纯化选择热变性除杂蛋白、过超滤膜、丙酮沉淀、Sephadex G100葡聚糖凝胶柱层析四步骤。最终得到SOD冻干粉在276nm处有最大吸收峰,双氧水显著抑制SOD活性,推测皱皮木瓜SOD为Fe-SOD。以过60目筛原料粉为试验材料,确定齐墩果酸的最佳提取工艺为:无水乙醇为溶剂,1:20料液比进行超声辅助提取,超声功率200W,温度60℃,时间为20min。总黄酮的最佳提取工艺为:70%浓度的乙醇水溶液为溶剂,料液比1:20,温度50℃超声辅助提取20 min,功率为200 W。总黄酮的纯化工艺优化为如下:采用ADS-17型大孔树脂,上样流速2 ml/min,样品液浓度2.04 mg/ml。洗脱液流速1.50 ml/min,以4 BV 10%乙醇水溶液洗脱除杂质,30%、50%乙醇水溶液进行梯度洗脱,洗脱体积分别为4 BV、3 BV。收集30%和50%乙醇洗脱液,浓缩干燥得到总黄酮产品。皱皮木瓜活性物质的综合提取利用方法为:依照优化的提取工艺,鲜果水提液提取SOD。榨汁后剩余干渣粉用无水乙醇提取齐墩果酸,醇提后的二次渣以70%乙醇提取总黄酮。皱皮木瓜鲜果中SOD比活力为689.98U/mgpr,即422.61U/g鲜果。SOD纯化后酶活回收率为7.89%,纯化倍数为17.36。分光光度法测得干渣粉中齐墩果酸含量为1.63%,原料粉中齐墩果酸含量为1.46%。齐墩果酸粗提液经纯化得到结晶,高效液相色谱法测得原料粉与干渣粉制得结晶纯度均可达到90%以上。干渣粉中总黄酮含量为7.63%,原料粉中总黄酮含量为8.64%。经大孔树脂纯化制得总黄酮产品后,黄酮纯品得率在1.5%-2%之间,纯度均可达约95%。应用皱皮木瓜鲜果同时提取三种目标活性成分,每100g鲜果中SOD活力42261U,榨汁副产物可综合提取齐墩果酸125.67mg,总黄酮588.27mg。本文进行皱皮木瓜多目标活性成分的综合提取利用研究,途径可行。皱皮木瓜加工副产物中含有可观含量的生物活性物质,具有较高利用价值,可为工业上利用加工副产物提供理论支持。
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