目的:重组蛋白A（Recombination protein A,RAD51）是一种多功能蛋白,在DNA双链断裂修复和维持端粒的稳定中起着至关重要的作用,曾被认为是细胞对放射敏感性的主要决定因素。甲磺酸伊马替尼是一种相对特异性的酪氨酸激酶Bcr-Abl抑制剂,在治疗胃肠间质瘤（Gastrointestinal stromal tumor,GIST）中主要是通过抑制C-kit的持续性激活,导致下游PI3K/AKT信号通路的激活抑制,研究表明它有可能增加放射治疗的敏感性,但其机理尚不明确。本团队前期研究表明,甲磺酸伊马替尼可能是通过间接调节RAD51的表达水平,增强了GIST882细胞对放射的敏感性。本研究首先通过体外细胞生物学实验,观察过表达RAD51的GIST-882在细胞增殖、侵袭、迁移能力以及对放射敏感性的变化,研究过表达RD51是否增加了GIST882细胞的增殖、侵袭、迁移能力以及对降低细胞对放射的敏感性;其次通过IM和IR对RAD51过表达的GIST-882细胞和转染空载质粒的（NC）组细胞进行干预,观察RAD51过表达的GIST-882细胞和NC组细胞之间细胞形态的变化和增殖差异,以及观察不同处理组对RAD51过表达的GIST-882细胞和NC组细胞之间的放射敏感性的差异变化,研究IM是否会影响IR对过表达RAD51的GIST-882细胞和NC组细胞的损伤效应;最后,通过蛋白质印迹和细胞凋亡技术探讨甲磺酸伊马替尼增敏GIST-882细胞放射治疗的作用机制,进一步阐明IM增强胃肠间质瘤细胞对放射敏感性可能的分子机制。因此,本研究的目的是,确定甲磺酸伊马替尼对RAD51表达水平与人源GIST-882细胞系的放射敏感性关系以及潜在的作用机制,为寻找胃肠间质瘤新的潜在靶点提供新的理论基础。方法:本研究首先通过体外细胞生物学实验,研究RAD51过表达对GIST-882细胞增殖、侵袭、迁移能力以及对放射敏感性的影响;其次通过IM和IR对RAD51过表达的GIST-882细胞和转染空载质粒的（NC）组细胞进行干预,观察RAD51过表达的GIST-882细胞和NC组细胞之间细胞形态的变化和增殖差异,以及观察不同处理组对RAD51过表达的GIST-882细胞和NC组细胞之间的放射敏感性的差异变化;最后,通过蛋白质印迹和细胞凋亡技术探讨甲磺酸伊马替尼增敏GIST-882细胞放射治疗的作用机制。具体方案如下:1.利用慢病毒构建RAD51过表达的GIST-882稳转细胞系,并在基因水平和蛋白水平进行验证过表达效率;2.采用细胞计数、CCK8实验、细胞横向迁移实验、Transwell细胞侵袭实验和平板克隆实验检测RAD51对GIST-882细胞增殖能力的影响;3.采用细胞计数、CCK8检测NC组细胞与RAD51过表达的GIST-882细胞之间增殖能力和放射敏感的差异;4.采用IM和IR干预后检测NC组细胞与RAD51过表达的GIST-882细胞之间细胞形态、增殖能力和放射敏感性的差异;5.采用流式细胞技术检测RAD51对细胞凋亡的影响以及不同处理组之间对细胞凋亡的影响;最后通过Western Blot检测不同处理对NC组细胞和RAD51过表达的GIST-882细胞相关蛋白变化。结果:1.成功构建RAD51过表达的GIST882细胞;2.与对照组相比,RAD51过表达促进GIST-882细胞的增殖、侵袭、迁移能力以及降低GIST-882细胞对放射敏感性;3.与单独作用的处理组相比,在对照组中甲磺酸伊马替尼联合电离辐射比较明显细胞变圆、萎缩以及漂浮改变,而在RAD51过表达的GIST882细胞中甲磺酸伊马替尼联合电离辐射也表现出细胞变圆、萎缩以及漂浮改变;4.通过CCK8实验技术检测不同处理增殖抑制结果显示,与单独作用的处理相比,在对照组中甲磺酸伊马替尼联合电离辐射对细胞的抑制比较明显,而在RAD51过表达的GIST882细胞中甲磺酸伊马替尼联合电离辐射对细胞有抑制作用,但抑制作用不明显;5.通过流式细胞技术检测不同处理细胞凋亡率显示,与单独处理组相比,在对照组细胞中甲磺酸伊马替尼联合电离辐射对细胞凋亡率明显增多,而在RAD51过表达的GIST882细胞中甲磺酸伊马替尼联合电离辐射对细胞凋亡率增加。结论:1、RAD51增强GIST-882细胞增殖、侵袭、迁移能力以及降低对电离辐射敏感性;2、甲磺酸伊马替尼在不同程度抑制NC组细胞和RAD51过表达的GIST882细胞的增殖能力,以及增强NC组细胞和RAD51过表达的GIST882细胞对放射的敏感性;3、甲磺酸伊马替尼可能通过抑制酪氨酸激酶受体的持续性激活,引起PI3K和AKT蛋白的磷酸化降低进而减弱PI3K/AKT信号通路的激活,间接抑制RAD51的表达,增强GIST-882细胞的对电离辐射的损伤作用,促进细胞凋亡。