不同针灸疗法对中老年部分雄激素缺乏综合征大鼠生殖内分泌的影响及作用机制研究

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背景:中老年部分雄激素缺乏综合征(partial androgen deficiency of aging male, PAD AM)是男性从中老年向老年期过渡阶段时,因机体逐渐衰老,性腺功能减退而导致雄激素调节紊乱,从而出现的一组以精神神经症状、植物神经功能紊乱、心理障碍、性功能减退为主要表现的临床症候群。目前,雄激素补充疗法(testosterone supplementation therapy, TST)被认为是治疗PADAM的“黄金法则”,它虽然直接针对病因进行治疗,能显著提升患者体内的雄激素水平,但仍面临着可能升高血红蛋白水平、导致前列腺癌变、增加不受控制的充血性心力衰竭等心血管事件的风险。针灸应用于保健抗衰老已有2000余年的历史。近年研究也表明,针刺可以通过调节基因的表达来延缓衰老的进程;艾灸则可以减少细胞炎症因子,纠正免疫紊乱,调整自由基代谢失衡。由此,本课题应用不同针灸疗法治疗PADAM,探索能否找到安全、有效的治疗PADAM的新途径。目的:1.对比观察不同针灸疗法对PADAM大鼠生殖内分泌的影响;2.探索针灸治疗PADAM的相关作用机制。方法:1.将70只雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠随机分为2组:正常组(n=10)和造模组(n=60),造模组腹腔注射环磷酰胺复制PADAM大鼠模型。从造模成功的大鼠中随机选取50只平均分为5组:电针组、温和灸组、瘢痕灸组、药物组和模型组。电针组、温和灸组、瘢痕灸组均刺激“肾俞穴(BL23)”、“关元穴(CV4)”,连续治疗8周。于造模前、造模后1d、治疗后1d测定电针组、温和灸组、瘢痕灸组、药物组和模型组大鼠血清总睾酮(total testosterone, TT)、游离睾酮(free testosterone, FT)水平及大鼠悬尾不动时间和强迫游泳力竭时间。2.于治疗后1d测定正常组、模型组、电针组和温和灸组(方法1证实瘢痕灸疗效不如温和灸明显,且实验过程出现大鼠死亡,故不对其进行机制探讨)大鼠血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone, LH)水平;测定睾丸细胞色素P450侧链裂解酶(cytochrome P450 side chain cleavage, P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶型1(3β-hydroxysteroid dehydrogenase 1, 3β-HSD1)、细胞色素P45017α羟化酶(cytochrome P450 17a hydroxylase, P450c17)、17β-羟基类固醇脱氢酶型3(17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3,17(3-HSD3)、类固醇生长因子-1(steroidogenic factor 1,SF-1)蛋白及mRNA表达;测定睾丸超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和丙二醛(malonic dialdehyde, MDA)含量;HE染色及投射电镜观察睾丸Leydig细胞组织形态及病理学改变。结果:1.腹腔注射环磷酰胺后,造模组大鼠血清TT、FT水平显著下降(P<0.05)且低于正常组血清值95%置信区间,行为学(悬尾不动时间和强迫游泳力竭时间)部分改变,类似于PADAM病理变化,表明环磷酰胺能成功复制PADAM大鼠模型。2.电针组、温和灸组、瘢痕灸组与药物组血清TT、FT水平较治疗前及模型组均显著提高(P<0.05);温和灸与电针组、瘢痕灸组相比,疗效更加显著(P<0.05)。3.电针和温和灸能明显降低PADAM大鼠血清LH、FSH水平(P<0.05);提高P450scc.17β-HSD3、SF-1蛋白的表达(P<0.05);提高P450scc、3p-HSD1 mRNA的表达(P<0.05);提高睾丸SOD活性(P<0.05)而降低MDA水平(P<0.05);能显著改善睾丸Leydig细胞组织结构及病理学改变。结论:1.电针、温和灸与瘢痕灸均可提高PADAM大鼠血清TT、FT水平及肌张力和抗疲劳能力,其作用与丙酸睾丸素相当,而温和灸疗效则更佳。2.针灸(电针、温和灸)可调节促性腺激素(LH、FSH)的水平;可调节睾酮合成酶(P450scc、3p-HSD、P450c17、17p-HSD3和SF-1)蛋白及mRNA的表达;可调节自由基相关因子(SOD、MDA)的含量;可显著改善睾丸Leydig细胞组织结构及病理改变。这些可能都是针灸治疗PADAM的相关作用机制。
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