[背景]脂质代谢紊乱,特别是高胆固醇血症,是动脉粥样硬化性心血管疾病、肥胖症、脂肪肝等的主要致病因素。齐墩果酸(Oleanic acid)是一种五环三萜类化合物,它以游离脂肪酸或皂苷苷元的形式广泛分布于橄榄类植物和多种中草药中。研究表明,齐墩果酸(OA)具有许多益处,包括保肝、抗炎、降糖、降压、降血脂、保护内皮和抗动脉粥样硬化作用。齐墩果酸二氟甲酯(Difluoromethyl oleanolate;简称DFMO)是OA的一种新型衍生物,它的具体生物学特性尚未有文献报道。PCSK9是2003发现的一个与血液胆固醇代谢调节相关的基因,其主要生理学作用是促进肝细胞表面的低密度脂蛋白受体降解,导致血脂清除减少,从而升高LDL-C的水平,引起高脂血症及动脉粥样硬化的发生。由于PCSK9在肝脏脂质代谢调节中的重要作用,目前成为降脂药物研发的热门靶点。[目的]本课题旨在研究DFMO对HepG2细胞脂质摄取和蓄积的影响,并对其作用机制进行了初步探索,为研究靶向PCSK9的新型降脂药提供更多实验依据。[方法]Western blot检测PCSK9、LDLR、SREBP2、HNF1α的蛋白表达;细胞免疫荧光检测DFMO对HepG2细胞膜上LDLR的影响;DiI-LDL检测DFMO对HepG2细胞脂质摄取的影响;油红O染色检测DFMO对HepG2细胞脂质蓄积的影响。[结果]DFMO处理后HepG2细胞中的PCSK9、HNF1α的蛋白表达呈浓度和时间依赖性的降低;而LDLR、SREBP2的蛋白表达则呈浓度和时间依赖性升高;细胞免疫荧光检测显示DFMO能增加细胞膜上LDLR的表达;DiI-LDL检测显示DFMO能增加HepG2细胞的脂质摄取;油红O染色显示DFMO能降低HepG2细胞的脂质蓄积。[结论]DFMO能够降低PCSK9的表达,增加LDLR的水平,降低HepG2细胞内的脂质蓄积和增加细胞脂质摄取;其机制在于一方面上调SREBP2的蛋白表达,增加LDLR的表达,另一方面下调HNF1α的蛋白表达,降低PCSK9的表达,升高LDLR的表达。