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目的:1.构建CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型,观察肝窦毛细血管化的形成过程。2.探讨IL-10基因干预对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化的影响。方法:1.选用56只清洁级雄性SD大鼠,完全随机分为正常对照组(N组),肝纤维化模型组(M组),N组大鼠腹腔注射生理盐水2ml/kg,M组大鼠腹腔注射50%CCl4-蓖麻油混合液2ml/kg,均每周2次,共8周;分别于造模第3天、1周、2周、4周、6周、8周处死大鼠,收集肝组织和血清备用。HE染色、Masson染色观察肝组织炎症及纤维化程度,放射免疫法检测血清中HA的含量,透射电镜观察肝窦窦壁结构,S-P免疫组织化学检测各组大鼠肝脏CD31、LN、Col-IV的表达。2.选用30只清洁级雄性SD大鼠,完全随机分为正常对照组(N组),肝纤维化模型组(M组),rIL-10质粒治疗组(I组),空质粒对照组(P组),造模方法同前(N组:生理盐水,M、I、P组:50%CCl4-蓖麻油混合液);从第5周开始,N组和M组大鼠尾静脉注射林格氏液作为试剂对照,I组大鼠尾静脉注射pcDNA3-rIL-10质粒,P组大鼠尾静脉注射pcDNA3.0空质粒,均每周一次。所有大鼠于实验第8周末处死,收集肝组织和血清备用。生化检测血清ALT和AST的含量,HE染色、Masson染色观察肝组织炎症及纤维化程度,放射免疫法检测血清中肝纤维化相关指标(HA、LN、PCIII、Col-IV)的含量,透射电镜观察肝窦窦壁结构,S-P免疫组织化学检测各组大鼠肝脏CD31、LN、Col-IV的表达。结果:1.肝脏病理组织学证实CCL4诱导的大鼠肝纤维化模型构建成功,肝纤维化早期炎症细胞浸润、肝细胞变性坏死明显,中后期以胶原沉积、纤维间隔形成为主,仍见肝细胞变性坏死,炎症浸润不明显。2.透射电镜及免疫组化结果表明,在肝纤维化过程中,肝窦毛细血管化是逐渐形成的,LSECs失窗孔明显早于纤维间隔的形成,而肝窦内皮下基底膜出现在纤维间隔形成以后。3.经过IL-10基因干预后,与M组和P组比较,I组大鼠肝细胞变性坏死程度减轻,中央静脉周围炎症细胞浸润减少,胶原纤维沉积明显下降。I组血清ALT、AST、HA、LN、PCIII、Col-IV水平显著降低(P<0.05),Masson染色显示肝组织胶原纤维沉积明显减少(P<0.05);透射电镜显示I组肝组织内胶原纤维沉积较前减少,变薄,有窗孔视野多见,BM变得不连续、不明显,甚至部分视野可见窗孔,未见BM;免疫组化结果显示肝组织中CD31、LN、Col-IV表达显著降低(P<0.05)。结论:rIL-10基因干预能显著改善肝组织的炎症及纤维化程度,部分逆转肝窦毛细血管化的形成,IL-10抗肝纤维化作用与其能逆转、拮抗肝窦毛细血管化这一途径有关。