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目的：
通过研究葡萄籽原花青素(Grape seed proanthocyanidin，GSP)联合顺铂(cis-diamminedichloroplatinum，DDP)对人膀胱癌EJ细胞的影响及其可能的作用机制，为探讨和开发更安全有效的肿瘤联合化疗方案提供实验依据。
方法：
体外培养人膀胱癌EJ细胞株，取对数生长期细胞用于实验，细胞分为对照组、GSP组、DDP组和联合用药组。经不同浓度药物单独(GSP组药物终质量浓度分别为5、10、20μg/mL，DDP分别是5、10和20μg/mL)或联合处理(DDP+GSP联合用药终质量浓度GSP是10μg/mL、DDP分别是5、10和20μg/mL)后研究药物对EJ细胞增殖的影响。①倒置显微镜观察细胞形态学变化，采用CCK-8法检测药物对EJ细胞增殖的影响；②流式细胞术检测EJ细胞的凋亡率。在证实了GSP和DDP对EJ细胞具有增殖抑制和诱导凋亡作用的基础上，对二者的作用机制进行了初步探讨；③采用pNA偶联显色法检测EJ细胞Caspase-3的活性；④采用活性氧(ROS)检测试剂盒利用荧光探针DCFH-DA进行EJ细胞ROS检测；⑤采用黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)分析EJ细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力；⑥用微量还原型谷胱甘肽(GSH)测定试剂盒采用DTNB显色法测定EJ细胞GSH含量。
结果：
1.GSP和DDP对膀胱癌EJ细胞分别都有明显的增殖抑制作用，并呈剂量依赖关系，联合作用组的增殖抑制作用明显高于单纯GSP组和单纯DDP组，差异有统计学意义(P＜0.05)；2.GSP组和DDP组细胞凋亡率和Caspase-3的表达量都明显高于对照组，且联合用药组细胞凋亡率及Caspase-3的表达量均高于单用药组(P＜0.05)；3.GSP和DDP二者都能诱导EJ细胞ROS含量呈剂量依赖性增加(P＜0.05)，DDP+GSP组作用更明显；4.GSP组、联合组EJ细胞内的SOD活力均高于对照组(P＜0.05)，DDP组与对照组相比差异无显著性(P＞0.05)；GSH含量在DDP组和联合组都低于对照组(P＜0.05)，GSP组与对照组无显著差异(P＞0.05)。
结论：
1.GSP与DDP两者联用对膀胱癌EJ细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用效果优于各自单用药组。
2.二者诱导凋亡作用与激活Caspase-3和诱导ROS过量产生有关。
通过研究葡萄籽原花青素(Grape seed proanthocyanidin，GSP)联合顺铂(cis-diamminedichloroplatinum，DDP)对人膀胱癌EJ细胞的影响及其可能的作用机制，为探讨和开发更安全有效的肿瘤联合化疗方案提供实验依据。
方法：
体外培养人膀胱癌EJ细胞株，取对数生长期细胞用于实验，细胞分为对照组、GSP组、DDP组和联合用药组。经不同浓度药物单独(GSP组药物终质量浓度分别为5、10、20μg/mL，DDP分别是5、10和20μg/mL)或联合处理(DDP+GSP联合用药终质量浓度GSP是10μg/mL、DDP分别是5、10和20μg/mL)后研究药物对EJ细胞增殖的影响。①倒置显微镜观察细胞形态学变化，采用CCK-8法检测药物对EJ细胞增殖的影响；②流式细胞术检测EJ细胞的凋亡率。在证实了GSP和DDP对EJ细胞具有增殖抑制和诱导凋亡作用的基础上，对二者的作用机制进行了初步探讨；③采用pNA偶联显色法检测EJ细胞Caspase-3的活性；④采用活性氧(ROS)检测试剂盒利用荧光探针DCFH-DA进行EJ细胞ROS检测；⑤采用黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)分析EJ细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力；⑥用微量还原型谷胱甘肽(GSH)测定试剂盒采用DTNB显色法测定EJ细胞GSH含量。
结果：
1.GSP和DDP对膀胱癌EJ细胞分别都有明显的增殖抑制作用，并呈剂量依赖关系，联合作用组的增殖抑制作用明显高于单纯GSP组和单纯DDP组，差异有统计学意义(P＜0.05)；2.GSP组和DDP组细胞凋亡率和Caspase-3的表达量都明显高于对照组，且联合用药组细胞凋亡率及Caspase-3的表达量均高于单用药组(P＜0.05)；3.GSP和DDP二者都能诱导EJ细胞ROS含量呈剂量依赖性增加(P＜0.05)，DDP+GSP组作用更明显；4.GSP组、联合组EJ细胞内的SOD活力均高于对照组(P＜0.05)，DDP组与对照组相比差异无显著性(P＞0.05)；GSH含量在DDP组和联合组都低于对照组(P＜0.05)，GSP组与对照组无显著差异(P＞0.05)。
结论：
1.GSP与DDP两者联用对膀胱癌EJ细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用效果优于各自单用药组。
2.二者诱导凋亡作用与激活Caspase-3和诱导ROS过量产生有关。