第一部分射频消融损毁冠状静脉周围交感神经对正常犬心室电生理特性的影响研究目的观察冠状静脉周围交感神经射频消融对正常犬左室电生理特性的影响。通过左侧交感神经节刺激,观察冠状静脉周围射频消融対心脏交感神经支配的作用。研究方法16只成年杂种犬,随机分为消融组(n=8)和假手术组(n=8)。消融组犬在开胸后,放置消融电极在与左前降支伴行的心大静脉旁,自左前降支起始至心尖部依次消融心大静脉周围组织。假手术组开胸后将消融电极置于同样位置,但未给消融能量。分别在开胸稳定和消融/假消融后1h,采用程控刺激测量左心室表面6个位点有效不应期和心外膜细胞的单相动作电位时长。之后分离暴露左侧交感神经节,给予5分钟电刺激后立即复测相同位点有效不应期,同时观察刺激前后心率、血压和心电图等变化。实验结束后行病理切片检查消融或假消融部位的血管和交感神经纤维。结果用均数±标准差来表示,消融组和假手术组的结果采用配对t检验比较,p<0.05表示差异显著。所有统计学结果使用SPSS 21.0软件分析。研究结果1.病理切片显示假手术组冠状动脉血管内膜完整,无血栓形成,心肌细胞无损伤,TH染色显示血管周围交感神经纤维分布丰富,染色正常。消融组冠状动脉血管内膜完整,无血栓形成,TH染色显示冠脉血管周围交感神经纤维分布明显减少;2.消融组经冠状静脉周围交感神经射频消融后,左心室外膜各位点ERP值较基础状态明显延长(174.2±8.8ms vs.163.5±8.1ms,p<0.05),假手术组假消融后ERP值与基础状态相比未出现明显改变(164±7.4ms vs.163.1±7.8ms,p>0.05);3.消融组和假手术组在消融或假消融前后左心室ERP离散度均未有明显改变(0.028±0.003 vs.0.021±0.005,p>0.05;0.024±0.005 vs.0.028±0.003,p>0.05);4.左侧交感神经节刺激后,假手术组和消融组左心室外膜ERP值较刺激前均明显缩短(142.2±4.9ms vs.163.1±7.8ms,p<0.05;170.8±7.9ms vs.174.2±8.1ms,p<0.05)。但消融组所有位点ERP值均明显大于假手术组(170.8±7.9ms vs.142.2±4.9ms,p<0.05);5.消融组冠状静脉周围交感神经射频消融后,左心室外膜MAPD90较基础状态明显延长(235.7±13.8ms vs.213.7±9.7ms,p<0.05);而假手术组未有明显改变(214.4±6.9ms vs.216.4±8.6ms,p>0.05);6.假手术组和消融组在消融或假消融前后动脉收缩压和心率无明显变化(p>0.05)。在左侧交感神经节刺激后,心率无明显改变(151±13bpm vs.149±11 bpm,p>0.05;151±12 bpm vs.148±11 bpm,p>0.05),而收缩压较刺激前明显升高(162±13mm Hg vs.141±13 mm Hg,p<0.05;149±15 mm Hg vs.146±14 mm Hg,p<0.05),交感神经刺激后消融组收缩压明显低于假手术组(149±15 mm Hg vs.162±13mm Hg,p<0.05);7.冠状静脉周围组织切片TH染色结果显示消融组交感神经纤维密度明显低于假手术组(482.97±173.9 vs.1416.02±336.06,p<0.05)。结论1、冠状静脉周围交感神经射频消融能部分损毁左室交感神经,有着较高安全性和有效性;2、消融损毁交感神经能够显著延长左心室有效不应期和动作电位时长,但不影响左室的不应期离散度;3、消融损毁交感神经能部分抑制左侧交感神经节刺激引起的心脏正性变力作用。第二部分射频消融损毁冠状静脉周围交感神经对急性心肌梗死犬交感神经活性与心室电生理特性的影响研究目的观察冠状静脉周围交感神经射频消融对心肌梗死犬神经体液及左室电生理特性的影响,并探讨消融损毁冠状静脉周围交感神经对缺血后室性心律失常的影响。研究方法18只成年杂种犬,随机分为消融后心梗组(n=9)和心梗对照组(n=9)。消融组犬开胸后,放置消融电极在冠状静脉旁,自左前降支起始至心尖部依次消融心大静脉周围组织,假手术组开胸后将消融电极放于同样位置,但未给消融能量。稳定60min后,结扎所有犬前降支第一对角支,建立犬急性心梗模型。分别于消融或假消融1h后及结扎冠脉30min后经冠状静脉窦处取血检测心脏局部去甲肾上腺素浓度,同时重复测量左心室表面6个位点的有效不应期。实验全程监测动态心电图,并记录心梗后1h内室性心律失常的发生情况,采用电刺激测量室颤诱发阈值。实验结束后行病理检查梗死周边的血管及交感神经损伤情况。结果用均数±标准差来表示,去甲肾上腺素浓度、室性早搏、室性心动过速的变化采用独立样本t检验,ERP变化采用配对t检验,直接概率法对比自发室颤发生率。p<0.05表示差异显著。所有统计学结果使用SPSS 21.0软件分析。研究结果1.心梗后对照组梗死区域MAPD90较基础状态明显缩短(197±6.7ms vs.214.4±6.9ms,p<0.05);而消融组梗死区MAPD90与基础状态相比无明显差异(215.7±5.3ms vs.213.4±9.6ms,p>0.05);2.对照组和消融组远离梗死区MAPD90在冠脉结扎前后未有明显变化(217.2±8.3ms vs.214.4±10.3ms,p>0.05;229.1±8.8ms vs.234.4±10.8ms,p>0.05);3.两组动物心梗后ERP值较心梗前明显缩短(143.8±10.8ms vs 156.9±11.4ms,p<0.05;165.3±14.8 ms vs 175±13ms,p<0.05),其中梗死区缩短更为明显(p<0.05);4.心梗后两组犬心底部和心尖部ERP缩短值无明显差异(9.6±7.1ms vs13.1±7.2ms,p>0.05;10.2±3.9ms vs 14.2±5.2ms,p>0.05);而消融组梗死区ERP缩短值明显小于对照组(17.4±7.1ms vs 31.9±9.4ms,p<0.05);5.心梗前消融组和对照组左心室有效不应期离散度无明显差别。但心梗后30分钟,消融能组不应期离散度明显小于对照组(0.0364±0.015 vs 0.0734±0.0177,p<0.05);6.对照组和消融组犬心梗后心脏局部NE浓度较结扎前均明显升高(576.9±78.5ng/L vs.199.1±25.9ng/L;292.1±59.8 ng/L vs.196.5±20.8ng/L p<0.05),但消融组NE浓度明显低于对照组(292.1±59.8 ng/L vs.576.9±78.5 ng/L p<0.05);7.消融组心梗后1h内的室性早搏总数(51±35.4 vs.117.6±56.1,p<0.05)、室性心动过速发作次数(2.1±0.6 vs.6±2.4,p<0.05)和平均持续时间(1.6±0.6s vs.2.7±1s,p<0.05)均明显低于对照组,对照组有3只犬(33%,n=9),而消融组只有1只(11%,n=9)出现自发室颤(p<0.05);其余犬电刺激诱发室颤发作,消融组室颤诱发阈值明显高于对照组(12±2.4 vs.16.2±2.1,p<0.05)。结论1、冠状静脉周围交感神经射频消融能够通过抑制交感神经活性,显著延长急性心梗后左室整体的动作电位时长;2、冠脉周围交感神经消融能延长心梗后左室有效不应期,对于梗死区更为显著,同时能降低心梗后左心室不应期离散度;3、冠脉周围交感神经消融能降低心肌局部去甲肾上腺素浓度,显著降低心梗后室性心律失常的发生,改善心室电不稳定性。第三部分射频消融损毁冠状静脉周围交感神经对心肌梗死犬恢复期交感神经分布与心室电生理特性的影响研究目的观察冠状静脉周围交感神经射频消融对心梗犬恢复期神经支配与心室复极的影响。研究方法12只成年杂种犬,随机分为消融后心梗组(n=4)、心梗组(n=4)及对照组(n=4)。消融组麻醉开胸后,自左前降支起始至心尖部依次消融心大静脉周围组织,心梗组和对照组开胸后将消融电极放于同样位置,但未给消融能量,分别结扎消融组和心梗组冠状动脉第一对角支,建立急性前壁心肌梗死模型。术中及术后应用青霉素预防感染,喂养4周后二次开胸,采用程控刺激测量左心室表面心尖部和心底部各2个位点有效不应期。分离暴露左侧星状神经节,给予5分钟电刺激后立即复测同样位点有效不应期。之后静脉给予去甲肾上腺素静滴,再次复测不应期。之后采用电刺激测量室颤诱发阈值。术后行病理检测不应期测量区域交感神经纤维分布情况。使用均数±标准差表示结果,配对t检验比较两组结果,p<0.05表示差异显著。所有统计学结果使用SPSS 21.0软件分析。研究结果1.二次开胸后对照组、心梗组和消融组心尖部和心底部ERP值之间没有明显差别(162.5±9.4ms vs.164±10.8ms;161.5±12.6ms vs.157.8±12.8ms;165.5±10.3ms vs.160±9.9ms,p>0.05);2.对照组左侧交感神经节刺激和去甲肾上腺素静滴后,心尖部和心底部ERP值均明显缩短(142.3±7.9 ms vs.162.5±9.4 ms;143.8±5.8ms vs.164±10.8ms;p<0.05);(147±8.6 ms vs.162.5±9.4 ms;148.8±6.2ms vs.164±10.8ms;p<0.05),两个区域之间没有明显差别;3.心梗组经左侧交感神经节刺激后,心底部ERP明显缩短(139.8±9.1ms vs.161.5±12.6,p<0.05),心尖部ERP值未出现明显改变(154±14.4ms vs.157.8±12.8ms,p>0.05),不同区域之间表现出明显差别;在去甲肾上腺素静滴后,心底部和心尖部位点的ERP值均明显缩短(137.3±14.8 ms vs.161.5±12.6 ms;122.8±9.8ms vs.157.8±12.8ms;p<0.05),但心尖部缩短程度明显大于心底部;4.消融组犬经交感神经节刺激后心底部和心尖部ERP值均未有明显改变(165.5±10.3ms vs.164.8±6.8 ms;160±9.9ms vs.163.2±12.3ms;p>0.05);去甲肾上腺素静滴后,心底部和心尖部的ERP值均明显缩短(123±10.7 ms vs.165.5±10.3ms;122.3±8.3ms vs.164.8±6.8ms;p<0.05)。两个区域之间没有明显差别;5.两组犬室颤诱发阈值,消融组明显低于对照组(12±2.4 vs.16.2±2.1,p<0.05)。6.病理切片TH染色显示心梗组心底部存在交感神经纤维支配,而心尖部心肌细胞周围的神经纤维十分稀少(2229.02±316.04vs.580.55±105.65,p<0.05);消融组心底部和心尖部区域内TH阳性纤维密度均较低(527.01±248.14 vs.472.89±420.16,p>0.05)。结论1、犬心肌梗死恢复期左心室外膜ERP已逐渐恢复至正常水平;2、心梗恢复期给予左侧交感神经刺激和去甲肾上腺素静滴,都可导致心室复极离散的发生,而冠状静脉周围交感神经消融预处理能有效改善恢复期由区域性失神经支配引起的复极离散;3、局部交感神经消融能增加心梗恢复期室颤诱发阈值,改善心室的电不稳定性。