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尽管对炎症性肠病的研究相当广泛，但其病理生理仍然不甚明了。肠道炎症的发生发展过程中，涉及到许多不同细胞间的相互作用，如肠上皮细胞、血管内皮细胞、肠神经细胞、肠粘膜内的肥大细胞、巨噬细胞以及外周血中的免疫细胞及炎症细胞。外周血白细胞向肠血管内皮聚集与血管内皮通透性增加在肠道炎症的发生发展过程中至关重要。许多因子参与调节肠血管内皮细胞的功能及其与白细胞的相互作用。其中，血管内皮生长因子(VEGF)同时具有血管内皮通透活性。然而我们对VEGF是如何调节内皮功能所知有限。我们课题组通过DNA微点阵对VEGF下游基因进行筛查，发现VEGF能高度诱导Orphan核受体家族。
核受体是一些转录因子，能直接调控基因表达来适应生长发育、生理上及环境中的刺激。因此，它们在生长发育、内环境稳态及疾病中起着重要作用。核受体超家族又可分为以下四类亚家族：核受体-I(过氧化物酶增生物激活受体等)、核受体-II(维甲酸X受体等)、核受体-III(雌激素受体等)以及核受体-IV家族。Orphan核受体Nur77(人：TR3，大鼠：NGFI-B)，Nurr1(人：Not1)与Nor-1(人：MINOR)都属于核受体-IV家族。在最近的文献报道中，这三种Orphan核受体无论其种属来源统称为Nur77，Nurr1和Nor1。在核受体超家族中，雌激素受体与过氧化物酶增生物激活受体(PPAR-γ)的功能主要是抑制免疫反应和炎症进程。然而，我们对这种新发现的Nur77核受体家族的功能所知甚少。
第一部分Nur77在炎症性肠病患者病变肠段的表达研究
目的：检测Nur77在炎症性肠病患者病变肠段的表达情况。
材料与方法：将BethIsraelDeconess医学中心胃肠科所提供的6例CD患者、9例UC患者及4例正常对照的结肠组织，采用TRIzol法提取总RNA，再经反转录后进行定量Real-TimePCR，测定Nur77的mRNA水平。将BethIsraelDeconess医学中心病理科所提供的5例CD患者、5例UC患者及2例正常对照的结肠石腊切片，进行免疫荧光染色及免疫组织化学染色，了解Nur77蛋白的表达情况。
结果：与正常对照肠段相比，CD与UC患者结肠Nur77mRNA水平明显升高(CD升高10倍，UC升高4倍，P均<0.05)。与正常对照结肠相比，急性期CD结肠微血管密度增加，在血管内皮细胞(CD31表达阳性)与渗出的白细胞中，Nur77蛋白表达水平升高，而在结肠上皮细胞中，其表达十分微弱。
结论：我们的研究显示，IBD患者结肠内Nur77表达水平升高，其表达主要位于血管内皮细胞与渗出的炎症细胞。
第二部分Nur77基因敲除小鼠与内皮细胞特异性Nur77转基因小鼠对DSS诱导的结肠炎的易感性研究
目的：利用Nut77基因敲除小鼠结肠炎模来研究Nur77在肠道炎症过程中的功能；利用内皮细胞特异性Nur77转基因小鼠来进一步了解血管内皮中的Nur77在肠道炎症过程中的功能。
材料与方法：各实验组小鼠(C57/BL炎症组12只，Nur77-/-炎症组12只，FVB炎症组12只，内皮细胞特异性Nur77转基因组12只)经2.5％DSS诱导急性结肠炎(另有C57/BL及FVB对照小鼠各6只)，比较各组小鼠的疾病活动情况(DAI)评分、组织学损伤评分、结肠重量/长度以及髓过氧化物酶(MPO)活性等炎症参数，明确各实验组小鼠对DSS诱导的急性结肠炎的易感程度。此外，我们还检测了各组小鼠外周血中及巨噬细胞所分泌的IL-8、TNF-α及IL-1β三种炎症细胞因子水平。
结果：经2.5％DSS致炎7天后，Nur77-/-组小鼠的平均DAI评分为6.9分，平均组织学损伤评分3.0分，平均结肠重量/长度为4.34mg/mm，平均MPO活性为0.61U/1cm结肠，均明显低于C57/BL组(上述参数分别为10.8分、5.5分、5.19mg/mm及1.35U/1cm结肠，P均<0.05)；Nur77-/-组小鼠外周血中及巨噬细胞所分泌的平均IL-8分别为537pg/ml和91pg/ml，明显低于C57/BL，组的1309pg/ml和954pg/ml(P均<0.05)，但TNF-α与IL-1β水平在两组间并无显著差异。内皮细胞特异性Nur77转基因组小鼠的平均DAI评分为10.4分，平均组织学损伤评分为6.3分，平均结肠重量/长度为6.16mg/mm，平均MPO活性为3.72U/1cm，均明显高于FVB组(上述参数分别为7.9分、3.3分4.37mg/mm及1.83U/1cm，P均<0.05)；外周血中及巨噬细胞所分泌的IL-8、TNF-α和IL-1β三种炎症细胞因子水平在Nur77转基因组与FVB组之间均未见显著差异。
结论：我们首次发现Nur77-/-小鼠对DSS诱导的急性结肠炎易感性降低，而内皮细胞特异性Nur77转基因小鼠则对DSS诱导的急性结肠炎易感性增加，这表明Nur77在DSS诱导的急性结肠炎中具有明显的促炎症功能。Nur77在急性结肠炎中的功能可能部分是通过调节细胞因子IL-8的分泌实现的。
第三部分Nur77调节IL-8表达与分泌的体外研究
目的：了解Nur77对IL-8的表达与分泌的调节作用。
材料与方法：制备Nur77质粒、IL-8-luc基因及NF-γB-luc基因。将Nur77质粒DNA(或作为对照的lacZ)与IL-8-luc基因或NF-γB-luc基因共同转染到巨噬细胞、结肠上皮细胞以及血管内皮细胞，检测这三种细胞中IL-8-luc和NF-γB-luc的荧光素酶活性，从而评估Nur77是否具有IL-8或NF-γB的转录激活功能。此外，构建包含Nur77的逆转录病毒，用以感染上述三种细胞，收集细胞培养液，经ELISA检测IL-8的分泌水平，从而了解Nur77是否可以促进这三种细胞IL-8的分泌。
结果：在结肠上皮细胞与巨噬细胞中，Nur77诱导的IL-8的相对表达高于lacZ诱导的IL-8相对表达，但在血管内皮细胞中，Nur77诱导的IL-8的相对表达却降低；Nur77诱导的NF-γB的相对表达则在三种细胞系中均升高(上述P值均<0.05)。结肠上皮细胞与巨噬细胞经Nur77刺激后，所分泌的IL-8水平分别为758pg/ml和825pg/ml，明显高于lacZ空白刺激组(IL-8水平分别为193pg/ml和184pg/ml，P均<0.05)。而血管内皮细胞经Nur77刺激后，所分泌的IL-8水平为339pg/ml，反而明显低于lacZ空白刺激组(877pg/ml，P<0.05)。
结论：Nur77可以通过激活巨噬细胞及结肠上皮细胞中IL-8基因的转录功能从而增加巨噬细胞与结肠上皮细胞分泌的IL-8水平。但在血管内皮细胞中，Nur77则具有IL-8基因的转录抑制功能。