论文部分内容阅读
背景肺癌是目前造成肿瘤相关死亡最常见的肿瘤。肺癌中有80%是非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer，NSCLC），晚期非小细胞患者的5年生存率仅在16%左右。表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂（Epidermal growth factorreceptor-Tyrosine kinase inhibitor，EGFR-TKI）应用于临床，使部分患者有了改善预后的机会。获得更精准更丰富的生物学标记，以指导药物应用是肺癌研究领域重要突破点。蛋白质组学已成为全球生命科学研究的重要手段。通过蛋白质组学的研究，能够筛选出肺癌的差异表达蛋白用以早期诊断，还有望阐明肺癌的发生发展、转移机制，评估疗效和预后，指导个体化治疗，提高生存质量。目的本课题分别建立对EGFR-TKI敏感和耐药患者的血清二维电泳图谱，和无疾病进展生存（Progression-free survival，PFS）时间长短差异的患者的血清二维电泳图谱，以及所有患者在接受EGFR-TKI治疗不同阶段的二维电泳图谱，寻找血清差异蛋白，进一步探寻血清生物标记物用以筛选EGFR-TKI的优势及阶段性评价疗效。方法本课题利用差异凝胶电泳(Difference gel electrophoresis, DIGE)和基质辅助激光解析飞行时间质谱（Matrix-assisted laser desorption ionization，MALDI-TOF-MS）技术比较对EGFR-TKI敏感和耐药患者血清蛋白质组表达差异，比较PFS长短差异的患者的血清蛋白表达差异，并比较患者治疗前后血清蛋白表达的差异，对差异蛋白进行鉴定，从而筛选与EGFR-TKI疗效及预后相关的标记物。结果初步发现共15个蛋白质在比较组中存在表达差异。各组比较得到了具有1.5倍以上有显著性意义的差异蛋白质点共282个，经质谱鉴定各组共得到差异蛋白点42个，排除组间及组内重复，共发现15个差异蛋白质。结论1不同时间点的差异蛋白质是潜在的阶段性评价疗效的血清标记物。1.1纤维蛋白原α链（Fibrinogen alpha chain，FGA）、纤维蛋白原β链（Fibrinogenbeta chain，FGB）、细胞角蛋白10（type I cytoskeletal10，KRT10）在敏感组患者服用EGFR-TKI治疗之前高表达，而在服用EGFR-TKI疗效最显著时下降；补体C3（Complement C3）在敏感组患者服用EGFR-TKI治疗之前低表达，而在疗效最显著时升高。1.2细胞角蛋白10、纤维蛋白原α链和血清淀粉样蛋白P （Serum amyloidP-component，APCS）在PFS长组患者服用EGFR-TKI治疗之前高表达，在服药后下降；转铁蛋白（Serotransferrin，TF）和亚型1α-1-抗胰蛋白酶（Isoform1of Alpha-1-antitrypsin，SERDINA1）在PFS长组患者服用EGFR-TKI治疗之前低表达，在PD时升高。1.3血清淀粉样蛋白P在PFS短的患者中，接受EGFR-TKI治疗之前低表达，而在PD时高表达。2敏感和耐药之间的差异蛋白质可能是筛选应用EGFR-TKI优势人群的血清学标记物2.1纤维蛋白原γ链（Fibrinogen gamma chain，FGG）在敏感组患者服用EGFR-TKI治疗之前高表达，而在耐药组患者服用EGFR-TKI治疗之前低表达；纤溶酶原（Plasminogen，PLG）、细胞角蛋白1在敏感组患者服用EGFR-TKI治疗之前低表达，在耐药组患者服用EGFR-TKI治疗之前高表达。2.2纤溶酶原、细胞角蛋白1、细胞角蛋白10、补体C3、血红素结合蛋白（Hemopexin，HPX）、结合珠蛋白（Haptoglobin，HPR）在敏感组患者服用EGFR-TKI疗效显著时低表达，而在耐药组患者服用EGFR-TKI疾病进展时高表达；丛生蛋白（Clusterin，CLU）和血清淀粉样蛋白P敏感组患者服用EGFR-TKI疗效显著时低表达，在耐药组患者服用EGFR-TKI疾病进展时高表达。3PFS长短之间的差异蛋白质是潜在的预测预后的血清差异蛋白3.1细胞角蛋白1和补体C3在PFS短的患者治疗之前低表达，而在PFS长组高表达，纤维蛋白原β链在PFS短的患者中高表达，而在PFS长的患者中低表达。3.2载脂蛋白E（Apolipoprotein E，APOE）在PFS长组患者应用EGFR-TKI治疗后高表达，而在PFS短组下降。