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目的： 1.制备阳离子脂质超声造影剂（Cationic ultrasound contrast agent，C-UCA）和磁性脂质超声造影剂（Magnetic ultrasound contrast agent，M-UCA），并对其性能进行验证； 2.运用超声联合C-UCA方法转染增强型绿色荧光蛋白质粒（pEGFP），探讨C-UCA存在时的最佳转染参数； 3.将超声、C-UCA与聚乙烯亚胺（Polyetherimide，PEI）相结合，探讨三者协同增强Survivin-miRNA转染、诱导肿瘤细胞凋亡的可行性。 方法： 1.通过机械振荡法、薄膜水化-声振法以及薄膜水化-机械振动法制备具有阳离子性质的C-UCA及M-UCA，对制备的影响因素进行优化，并对C-UCA、M-UCA进行理化性质检测、形貌表征及体外性能验证。选取较合适参数制备C-UCA，较优的方法用于后续的基因递送研究中。 2运用已经优化的超声参数，对超声联合C-UCA转染pEGFP时的C-UCA浓度、质粒质量、细胞密度、培养基含血清与否和不同转染方式等进行优化，荧光显微镜下观察细胞的转染情况，流式细胞术测定其中一组的转染率，CCK-8实验检测转染后细胞的活力，筛选出最佳的转染参数。 3.将超声、C-UCA与PEI相结合介导Survivin-miRNA转染至Hela细胞，实验分为6组：质粒组（P组）、PEI+质粒组（PEI+P组）、超声+质粒组（US+P组）、超声+C-UCA+质粒组（UTMD+P组)、超声+C-UCA+PEI+质粒组（UTMD+PEI+P组）、空白组，通过倒置显微镜观察不同处理方式对细胞的影响，流式细胞术测定凋亡率，CCK-8实验测定转染后细胞活力。 结果： 1. C-UCA、M-UCA的制备优化及体外性能验证。 比较机械振荡法、薄膜水化-声振法和薄膜水化-机械振动法制备 C-UCA，发现采用机械振荡法和薄膜水化-机械振动法制备的效能更高。与薄膜水化-声振法相比，二者制备的C-UCA浓度更高，粒径更小，分布也更加均匀。采用最优方法制备的 C-UCA粒径＜1μm，浓度为1~10×109个/ml，分散性良好；将制备好的样品室温下放置4h，稳定性良好，4℃条件下可延长至1个月。其中，阳离子脂质含量为15％的C-UCA的基因携载量最高可达70%。随着C-UCA浓度的增加，Hela细胞生存率呈现一定的变化。当 C-UCA在20%浓度时其细胞活力为（88.6±3.4）%，与对照组和浓度为1%时比较，细胞活力显著降低（P＜0.05）。体外造影结果显示，C-UCA回声均质，后方未见明显衰减。将其稀释2000倍后，仍可以见到较为细腻的回声。 本研究还通过不同方法制备了M-UCA，其粒径和浓度较C-UCA差，但分散性良好，其室温下稳定性同C-UCA。基因携载量较C-UCA有所下降（27.65%）。M-UCA的浓度对Hela细胞的生存率也有一定的影响，随着浓度的增加，Hela细胞生存率下降。当M-UCA浓度为20%时，其细胞活力仅为（59.81±7.56）%。体外造影结果显示 M-UCA具有较好的体外造影能力。尽管如此，但是 M-UCA无论是在浓度、均一性、还是基因携载率和细胞毒性方面，均比C-UCA相差较远，有待进一步优化。因此，为了保证后续研究的顺利进行，本研究中选用了性能较好的C-UCA进行转染参数优化及凋亡实验的研究。 2.在前期优化超声参数（1MHz、20％DC、1W/cm2、1min）的基础上，经过一系列实验，确定最优的C-UCA浓度（5%）、质粒浓度（15μg）、细胞密度（1×106个/孔）、培养基（无血清）为最优参数，用于以下的研究中。 3. PEI+P组和UTMD+P组可显著诱导细胞凋亡，AI分别为39.4%、27.2%，显著优于其他各组（P＜0.05）。RT-PCR结果表明，PEI+P组与UTMD+P组时的Survivin mRNA抑制率明显高于其他组的时，差异均有统计学意义（P＜0.05）。通过转染后，各实验组细胞活力均有明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。其中，UTMD+PEI+P组的细胞活力[（48.27±12.24）%]显著低于其他各组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。 结论： 1.本研究采用机械振荡法、薄膜水化-声振法和薄膜水化-机械振动法制备了C-UCA和M-UCA，并对其外形、粒径及稳定性基因携载能力、细胞毒性，发现C-UCA更适用于联合超声介导的基因转染研究中。此外，C-UCA和M-UCA都具有较好的回声反射信号，为超声造影剂提供了一种新的尝试。 2.经过优化后的参数，在一定程度上可提高超声联合 C-UCA的转染效率，但其转染效率仍低于PEI。 3.单独使用PEI或超声联合C-UCA均可转染Survivin-miRNA，有效诱导肿瘤细胞凋亡，但二者的协同作用不明显。相反，超声、C-UCA及PEI联合使用会显著降低UTMD和PEI的转染效率，其具体机制有待进一步研究。