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背景:干细胞移植治疗肝硬化在动物实验、临床研究已被广泛研究,碱性成纤维细胞生长因子体外条件下可以促进干细胞增殖,利用bFGF培养后的干细胞治疗肝硬化的体内疗效目前尚不确定。目的:探索bFGF对BMSC生长和增殖的影响。加入0.1%bFGF培养后的骨髓间充质干细胞通过小鼠尾静脉注射后肝功能ALT、AST、ALB水平、组织病理学改变及胶原沉积变化情况。方法:全骨髓贴壁法提取雄性SD大鼠骨髓间充质干细胞;流式细胞检测BMSC。雌性昆明小鼠46只随机分为分为5组:A组(CCl4+PBS)、B组(CCl4+bFGF)、C组(CCl4+bFGF-BMSC)、D组(CCl4+bFGF+BMSC)、E组(CCl4+bFGF+BMSC3次移植)。小鼠CCl4造模10周后分别尾静脉注射bFGF+或bFGF-培养的BMSC,酶联免疫法检测肝功能,HE染色检测组织病理学改变情况;Masson三色染色法检测肝组织胶原沉积情况。结果:(1)BMSC生长情况:观察各组传代细胞的生长情况,bFGF-、bFGF+组细胞24h完全贴壁,贴壁细胞初期呈梭形或不规则形,细胞形态无明显异常,主要以梭形为主,bFGF+组细胞增殖较快,于第4天铺满瓶底。bFGF-组较bFGF+细胞生长相对缓慢,第6-7天时基本完全铺满细胞培养瓶。(2)细胞生长:10ng/ml bFGF体外培养条件下,BMSC生长速率显著高于无bFGF培养。(3)流式检测:CD29、CD44阳性表达,CD45呈阴性表达。(4)化学法检测肝脏功能:ALT水平在模型对照组(A组)与B组比较无显著性差异(P>0.05),C组、D组、E组ALT水平与A组、B组比较均有下降(两两比较具有显著性差异,P<0.05);ALT水平在D组、E组均较C组下降(P<0.05);E组较D组下降(P<0.05)。AST水平在A组与B组间无显著性差异(P>0.05);C组、D组、E组两两之间无显著性差异(P>0.05);而C组、D组、E组较A组或B组具有明显下降(P<0.05)。(5)HE染色结果:A组、B组HE染色见肝细胞明显水肿、脂肪变性、桥接坏死,肝索排列紊乱,假小叶广泛形成。C组肝细胞水肿、脂肪变性,炎性细胞浸润,但程度较模型组有所减轻,汇管区纤维沉积,可见假小叶结构;D组、E组肝细胞水肿情况、炎性细胞浸润程度较BMSC组明显改善,假小叶结构可见,汇管区可见纤维沉积。(6)Masson结果显示,A组、B组肝门脉区大量绿染纤维沉积,肝实质内绿色纤维浸润,纤细的纤维间隔从汇管区延伸至肝实质,分隔肝小叶形成假小叶。A组纤维面积较B组无显著性差异(P>0.05);与A组、B组相比,C组、D组、E组纤维量减少,较A组、B组明显改善,差异有统计学意义(p值均<0.05);C组、D组汇管区、肝实质有可见纤维沉积,但两组纤维面积无显著性差异(P>0.05);E组较C组、D组面积均有显著降低(P>0.05)。结论:体外培养加入bFGF后BMSC生长速度较无bFGF时显著提高,细胞形态大致相同,流式检测细胞表面标志物CD29、CD44、CD45表达与无bFGF时相同。BMSC移植能够改善肝硬化小鼠肝功能、肝硬化程度、胶原纤维沉积,培养中加入bFGF的BMSC更为显著地改善肝损伤程度和纤维化程度,重复细胞移植后肝纤维化程度改善更为显著。