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三疣梭子蟹在我国北起辽东半岛,南至广东,均有出产,在北部沿海产量颇大,在黄渤海渔业中占有相当重要的地位。近年来,我国近海的三疣梭子蟹自然资源量急剧下降。另外,池塘养殖三疣梭子蟹通常性腺发育不良。因此,本试验对东海的三疣梭子蟹进行了系统地卵巢发育规律研究,为人工调控三疣梭子蟹的性腺发育和人工养殖业的健康可持续发展奠定理论基础,期望能缓减育苗生产中对三疣梭子蟹自然资源的需求压力。
本实验通过在舟山海区定时定点连续采样,采用活体解剖观察、生化分析、石蜡切片及透射电镜技术等手段,系统研究了东海三疣梭子蟹卵巢发育期间的卵巢外部特征、卵巢指数(GSI)、肝胰腺指数(HSI)、卵巢发育分期及卵巢和肝胰腺的组织结构变化规律。研究结果如下:
1.三疣梭子蟹首次性成熟卵巢发育的研究
1)三疣梭子蟹首次生殖蜕壳和交配主要发生在9、10月,产卵主要在3、4月;
2)三疣梭子蟹卵巢发育期间,GSI显著增加,HSI呈现先上升后下降的趋势,GSI和HSI呈负相关性;
3)根据GSI、卵巢形态特征和组织学变化等,三疣梭子蟹卵巢发育可以分为6期。
2.三疣梭子蟹卵巢发育过程中肝胰腺的生化组成与其组织结构的关系
1)三疣梭子蟹第一次卵巢发育过程中HSI呈先上升后下降趋势,最大值在Ⅳ期(7.46±1.23%),最低值在Ⅵ期(4.62±0.63%);
2)三疣梭子蟹第一次卵巢发育过程中,肝胰腺中的生化组成存在显著变化,Ⅰ期肝胰腺中水分含量高达67.91%,其它各期间无显著差异,肝胰腺中脂肪/湿重含量呈先上升后下降趋势,Ⅰ期最低(13.48%),Ⅳ期最高(24.24%);肝胰腺中蛋白/湿重并无显著变化,而总糖/湿重呈显著下降趋势;
3)不同生理阶段雌体肝胰腺组织学存在两个较明显的变化:生殖蜕壳及产卵前后,生殖蜕壳前(I期)肝小管中B细胞占优势(约50%左右),R细胞较细长,肝小管内腔中存在大量食物残渣和脱落的B细胞顶泡等,生殖蜕壳后(Ⅱ期后)的雌体肝胰腺中R细胞数量较多,随着时间的推移R细胞逐渐饱满;产卵后雌体肝胰腺中的细胞间界限变得模糊,部分肝小管的管腔开始自溶,但是此时B、F细胞数量开始增多。
3.三疣梭子蟹卵巢发育过程中卵母细胞和滤泡细胞超微结构的观察
1)三疣梭子蟹初产卵巢发育过程中卵黄发生期可分为初期和后期;
2)卵黄发生初期在7~9月间,此阶段卵黄生成以内源性合成为主,卵母细胞核物质外输明显,胞浆内大量的粗面内质网正在进行卵黄物质的内源性合成;
3)卵黄发生后期在10月至第二年4月间,卵泡细胞与卵母细胞的结合阶段,卵母细胞借助卵泡细胞进行外源性卵黄物质合成,卵母细胞与卵泡细胞间的界线逐渐消失,部分卵泡细胞由于胞质大量输出仅见胞核,此时内源性卵黄合成仍然存在;
4)排卵后,由于大量成熟卵细胞的排出,卵巢组织存在大量的基膜,残留成熟卵母细胞中的卵黄物质已经解体,卵黄颗粒自中央向边缘逐渐松散。
4.三疣梭子蟹第二次卵巢发育规律的研究
1)三疣梭子蟹第二次卵巢发育过程可以分为4期。
2)三疣梭子蟹第二次卵巢发育期间,GSI显著增加,HSI变化不显著,GSI和发育天数呈显著正相关性,HSI和GSI的变化没有显著的相关性。