MADS-box基因是指含有保守的DNA结合域MADS盒的转录调控因子，它们广泛存在于真核生物界。MADS是由几个最初发现的成员——酵母MCM1、拟南芥AGAMOUS、金鱼草DIFICIENS和人类SRF——的首字母组合而来。MADS-box基因是一类重要调节基因，在植物发育(尤其是花器官发育以及同源异型转换中)过程中扮演着十分重要的角色。分离并研究MADS-box基因，将有助于探明植物生殖发育的分子模式，并为观赏植物和花卉品种的基因工程改良奠定基础。AGL15是MADS-box基因家族成员，研究显示具有延缓植物花朵衰老的功效，作用途径可能独立于乙烯介导的调控衰老途径。PMADS9是最近在观赏花卉矮牵牛中发现的AGL15亚家族基因，其功能尚未报道。本实验通过PCR技术从油菜基因组DNA中克隆出BnAGL15基因、从矮牵牛幼蕾cDNA中克隆出PMADS9基因，分别构建了植物表达载体，并利用农杆菌介导法将BnAGL15基因导入矮牵牛。主要实验结果如下：1．油菜BnAGL15基因的克隆与表达载体构建以油菜(Brassica napus)基因组DNA为模板，通过设计一对特异引物，利用PCR技术扩增获得BnAGL15基因(GenBank登录号：DQ418546)。序列分析表明，该基因长1695bp，含7个内含子，编码264个氨基酸。与已报道的序列(GenBank登录号：BNU22665)相比较，核苷酸序列及推导的氨基酸序列相似性分别为98.47％和99.25％。构建了正义植物表达载体pBIN-BnAGL15。2．矮牵牛PMADS9基因的克隆与表达载体构建以矮牵牛(Petunia hybrida)幼蕾cDNA为模板，通过设计一对特异引物，利用PCR技术扩增获得PMADS9基因(GenBank登录号：DQ418547)。序列分析表明，该基因长811bp，含—810bp的开放阅读框，编码269个氨基酸。与网上已公布序列(GenBank登录号：AY370526)比对，核苷酸相似性达99.75％，推测氨基酸序列相似性达99.26％。构建了正义植物表达载体pBL-PMADS9(+)和反义植物表达载体pBIN-PMADS9(-)。3．BnAGL15基因对矮牵牛的遗传转化利用农杆菌介导法将pBIN-BnAGL15导入矮牵牛中，共获得6个独立的矮牵牛抗性株系，其中4个株系移栽成活并开花。PCR检测初步确定BnAGL15基因已转入矮牵牛基因组中。