EIF3D基因对于胆管癌细胞增殖迁移能力影响

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目的:胆管癌是一种起源于胆管上皮细胞的,发病率位于原发性肝癌第二位的恶性肿瘤,由于其缺乏早期诊断指标及易早期侵袭的特点,导致胆管癌死亡率高居不下。eIF3d基因是一种在翻译起始阶段起重要作用的基因,目前已经有很多关于eIF3d基因在肿瘤中的研究,并且它被发现有不同程度的促癌作用,然而其在胆管癌发病过程中起到的作用尚未明确。本研究主要通过慢病毒转染技术敲减胆管癌细胞中eIF3d基因的表达,进而研究其对于胆管癌细胞株增殖,迁移,及细胞周期,细胞体内成瘤情况的影响。从而探讨e IF3d基因能否影响胆管癌细胞生长及在细胞生长中发挥的作用,推测其对胆管癌发生发展的影响。方法:1.构建慢病毒并转染获得稳定的低表达eIF3d基因的胆管癌HCC-9810及RBE细胞系。2.进行体外细胞实验如,克隆形成实验,MTT实验,Transwell实验,验证了体外eIF3d基因对于胆管癌细胞增殖迁移影响,流式细胞仪检测敲减eIF3d基因对于胆管癌细胞周期的影响。通过Western-blot(过蛋白印记实验)检测细胞转移及周期相关蛋白表达改变情况。3.设计体内实验,构建裸鼠成瘤模型,探究eIF3d基因在裸鼠体内对胆管癌细胞成瘤的影响。结果:通过慢病毒转染,我们获得了稳定低表达eIF3d基因的胆管癌HCCC-9810及RBE细胞系。在其后的体外细胞实验中,发现了抑制e IF3d基因表达可明显的抑制体外胆管癌细胞的增殖,迁移能力。在用流式细胞仪对细胞周期进行检测后,发现抑制eIF3d基因后,胆管癌细胞周期进程受到明显的阻滞,其中S和G2/M期群体的细胞数显著减少,G1期的细胞数量增加。细胞体内实验裸鼠成瘤实验中e IF3d基因敲减组形成瘤体的大小明显小于对照组。结论:本研究探索了eIF3d基因在胆管癌细胞的增殖迁移中起到的作用,发现e IF3d基因在胆管癌增殖迁移中的促癌作用,包括促进胆管癌细胞增殖,迁移能力,影响细胞周期进程。为胆管癌的早期诊断和后期治疗提供一个潜在的基因位点。
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