弯曲菌（Campylobacter）是一种重要的食源性人兽共患病原菌,主要引起腹泻等疾病,严重威胁家禽养殖和人类健康。目前关于弯曲菌流行病学的研究主要集中于白羽肉鸡养殖场和市场,肉鸡屠宰过程中的交叉污染也是弯曲菌的重要传播途径,但是目前缺乏对屠宰场弯曲菌流行病学的研究。黄羽肉鸡是我国特色的肉鸡品种,其养殖和屠宰模式也与白羽肉鸡不同,目前关于黄羽肉鸡屠宰场弯曲菌的流行特点也鲜有研究,因此,本研究以黄羽肉鸡屠宰场为研究对象,开展黄羽肉鸡屠宰过程中弯曲菌的流行病学研究,并且结合现代微生物风险评估技术,建立了黄羽肉鸡屠宰过程中弯曲菌的暴露评估模型和多重耐药释放评估模型,旨在为弯曲菌的风险评估、监测和防控提供数据支持。2018年12月至2019年6月,本研究选取广东省某黄羽肉鸡屠宰场定期从活鸡肛拭子、打毛、开膛、清洗、预冷等环节及环境中采集样品共1102份,分离弯曲菌157株,分离率14.2%,其中结肠弯曲菌占53.5%（84株）,空肠弯曲菌占43.9%（69株）,另外4株弯曲菌（2.5%）未分型。比较屠宰链的不同环节发现弯曲菌检出率以活鸡肛拭子环节最高（53.6%）、其次为打毛（27.5%）与开膛环节（18.1%）、经过清洗环节后弯曲菌检出率大幅下降至2.1%,预冷环节达到最低（1.4%）,环境中弯曲菌检出率为2.5%,结果表明屠宰过程中的生物安全防控措施能够有效的防控弯曲菌的污染。应用K-B纸片法检测12种常用抗菌药物耐药性,结果表明耐药率最高为萘啶酸（86.6%）,值得关注的是红霉素（66.2%）与庆大霉素（56.1%）作为治疗弯曲菌感染的一线药物的耐药率均超过50%。90.4%（142/157）为多重耐药菌（MDR）,且存在一株弯曲菌对12种抗菌药全部耐药,共有75种不同的耐药模式。耐药基因检测发现,检出率以四环素类tet（o）（75.2%）,大环内酯类erm B（63%）,氨基糖苷类aph（2"）-If（44.6%）为主,同时,测序结果表明在23S r RNA的V区域、gyr A、L4、L22基因均发现新的突变,值得关注的是36.8%的红霉素耐药株在23S r RNA的V区域发现新的C2113T突变,高于常见的A2075G突变（18.9%）,提示红霉素耐药可能与新发现的突变有关。进一步检测10个毒力相关基因,结果表明存在情况由高到低依次为cad F（81.5%）、cdt A（66.2%）、cdt B（61.1%）、cia B（57.3%）、fla A（52.9%）、ima A（45.9%）、dna J（44.6%）、rac R（41.4%）、cdt C（31.8%）、vir B11（1.3%）。脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型法分析66株空肠弯曲菌和83株结肠弯曲菌。结果表明,66株空场弯曲菌可分为14个基因簇和19个单一基因型,83株结肠弯曲菌可分为17个基因簇和29个单一基因型,基因型复杂多样,肉鸡屠宰不同环节间存在克隆传播和交叉污染。基于以上屠宰场弯曲菌流行病学数据,进一步定量检测肉鸡胴体上的弯曲菌污染量,发现活鸡肛拭、打毛环节呈现高污染量平均值分别为1.83 log MPN/m~2和0.5log MPN/m~2,开膛与清洗预冷环节呈低水平污染平均值分别为0.027 log MPN/m~2和0.01log MPN/m~2,总体变化趋势与弯曲菌检出率基本一致。利用@Risk软件,分别建立黄羽肉鸡屠宰过程暴露评估模型及多重耐药释放评估模型。通过黄羽肉鸡屠宰过程暴露评估模型模拟结果表明,肛拭、打毛、开膛、清洗预冷环节的模拟结果与实际检测结果较为吻合,进一步分析可知打毛环节弯曲菌污染浓度和开膛环节弯曲菌污染浓度为屠宰过程中重要的风险因子,相关系数分别为0.77和-0.39。多重耐药释放评估模型结果显示屠宰后多重耐药菌的释放概率88.16%,本研究获得的多重耐药率为90.4%,模拟结果与实际检测结果较为吻合说明该模型能较为准确的反映多重耐药菌在屠宰过程中的释放概率。综上所述,本论文开展了黄羽肉鸡屠宰过程中弯曲菌的流行病学研究,发现活鸡肛拭子和打毛是肉鸡屠宰过程中弯曲菌高污染环节,发现屠宰场弯曲菌普遍存在多重耐药,耐药基因检测发现23S r RNA的V区域等多个新的潜在耐药相关突变位点,为进一步解析弯曲菌的耐药机制奠定了基础。同时,成功建立了黄羽肉鸡屠宰过程中弯曲菌的暴露评估模型和多重耐药释放评估模型,找到了屠宰过程中弯曲菌的关键控制点,为弯曲菌等重要食源性人兽共患病的防控、风险评估和预警体系建设提供了技术支持。