MiR-145-5p基于对N-cadherin和ZEB2的调控影响膀胱癌细胞生物学特性的研究

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目的:膀胱癌(BCa)是泌尿系统常见的肿瘤之一,其容易复发转移,致死率居高不下,一直困扰着临床医生。本文旨在研究miR-145-5p、ZEB2表达量与膀胱癌患者临床病理数据之间的关系;通过过表达/抑制miR-145-5p的方法,在膀胱癌T24细胞株中,探究miR-145-5p对T24细胞增殖、侵袭、迁移等生物学特性的影响,并初步探究miR-145-5p基于ZEB2及N-cadherin的调控机制。方法:收集2018年9月-2020年9月期间厦门大学附属第一医院膀胱癌患者术后癌及癌旁组织样本共34例,运用qRT-PCR方法检测miR-145-5p表达量,将检测数据和患者临床病理数据进行统计学分析,明确miR-145-5p表达量与临床病理数据的关系。筛选TCGA数据库中含有ZEB2表达量数据的膀胱癌患者,将ZEB2表达量与临床病理数据进行相关性分析,明确ZEB2表达量与临床病理数据的关系。通过细胞转染,在膀胱癌T24细胞株中过表达和抑制miR-145-5p,探究miR-145-5p对膀胱癌细胞生物学特性的影响,初步探究可能的作用机制。结果:1 qRT-PCR法测得癌及癌旁组织miR-145-5p表达量,显示miR-145-5p在膀胱癌组织中表达量低于癌旁组织,在浸润性癌中低于非浸润性癌(P<0.05),表达量与年龄、性别和肿瘤大小之间关系无统计学意义(P>0.05);其表达水平与膀胱癌的TNM分期及病理分级负相关(P<0.05);2TCGA数据库中膀胱癌患者组织ZEB2表达量与人种、TNM分期、病理分级及淋巴转移显著相关(P<0.05),且与TNM分期、病理分级正相关(P<0.05),与性别、年龄、远处转移及生存时间未有明显关联(P>0.05);年龄、肿瘤TNM分期、病理分级、ZEB2表达量高低与膀胱癌转移具相关性(P<0.05);3膀胱癌T24细胞株过表达miR-145-5p后,ZEB2表达降低,N-cadherin蛋白表达降低(P<0.05);CCK8实验显示过表达miR-145-5p的T24细胞增殖能力降低(P<0.05);划痕实验显示过表达miR-145-5p的T24细胞划痕愈合能力减弱(P<0.05);Transwell实验显示过表达miR-145-5p的T24细胞穿膜能力低于对照组(P<0.05)。结论:1膀胱癌组织中miR-145-5p表达水平低于癌旁组织;miR-145-5p表达量与临床病理数据关系密切,高表达miR-145-5p的膀胱癌倾向更好的病理分级;2膀胱癌组织ZEB2表达量与临床病理数据关系密切,高表达ZEB2的膀胱癌倾向于较差的病理分级;3过表达miR-145-5p降低了膀胱癌T24细胞株增殖、侵袭、迁移能力。miR-145-5p可作用于下游ZEB2影响N-cadherin,从而抑制膀胱癌EMT过程。
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